版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜

返回列表

當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖

33ggdf

新蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 53.7
紅花: 1
帖子: 63
在線(xiàn): 17.9小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2186428
注冊(cè): 2012-12-14
專(zhuān)業(yè): 植物遺傳學(xué)

[交流] 關(guān)于T4連接酶大家交流下已有8人參與

我用的是NEB公司的T4普通連接酶，我的質(zhì)粒比較大有15k左右，目的片段1k，現(xiàn)在我要連接，我是用熱擊的方法好呢還是用電轉(zhuǎn)好？如果用電轉(zhuǎn)的話(huà)電壓應(yīng)該怎么設(shè)置呢？還有就是這個(gè)酶連接之后要熱失活嗎？以前用的不是這個(gè)公司的酶，都不用失活，可以直接轉(zhuǎn)化的呀，不知這個(gè)到底需不需要？？

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇” 已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有161人回復(fù)
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn) 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

TAKARA的 T4 DNA 連接酶在室溫下多久會(huì)失活?如果在16℃下反應(yīng)多久會(huì)失活? 已經(jīng)有9人回復(fù)
全式金的T4 DNA 連接酶效果怎么樣？？已經(jīng)有6人回復(fù)
誰(shuí)用過(guò)Fermentas的T4連接酶？已經(jīng)有23人回復(fù)
T4連接酶連接問(wèn)題已經(jīng)有7人回復(fù)
麻煩大家給推薦下性?xún)r(jià)比較高的T4 DNA連接酶，想知道有沒(méi)有國(guó)產(chǎn)的效果還不錯(cuò)的已經(jīng)有3人回復(fù)
使用T4連接酶的問(wèn)題已經(jīng)有4人回復(fù)
大家都用什么連接酶��？已經(jīng)有10人回復(fù)
【求助/交流】T4酶連體系已經(jīng)有17人回復(fù)
【求助/交流】寶生物T連接用的solution1可以代替T4連接酶嗎？已經(jīng)有9人回復(fù)
【求助/交流】T4 DNA聚合酶怎么用？已經(jīng)有3人回復(fù)
【交流討論】今年赴英國(guó)聯(lián)合培養(yǎng)竟然被簽證官要求申T5（更新：已拿到T4簽證）已經(jīng)有28人回復(fù)

1樓 2013-08-27 15:44:42

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

Haibara_Ai

銅蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 57 (初中生)
金幣: 1896.7
紅花: 3
帖子: 262
在線(xiàn): 306.9小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2222431
注冊(cè): 2013-01-05

★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-08-27 22:23:38

電轉(zhuǎn)化不失活也能轉(zhuǎn)，不過(guò)按照NEB說(shuō)法轉(zhuǎn)化效率會(huì)下降。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

3樓2013-08-27 21:29:46

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

查看全部 12 個(gè)回答

bullfrog325

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

MolEPI: 1
應(yīng)助: 193 (高中生)
金幣: 2880.3
散金: 200
紅花: 24
帖子: 744
在線(xiàn): 269.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1864929
注冊(cè): 2012-06-20

★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-27 21:59:11

我做過(guò)比這個(gè)還大的質(zhì)粒, 用的也是NEB普通T4 DNA連接酶.
我用的是熱擊, 沒(méi)有任何問(wèn)題 (沒(méi)有嘗試過(guò)電轉(zhuǎn), 所以不知道兩者效果差別). 不需要在熱擊前讓酶失活.

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）

33ggdf

2樓2013-08-27 18:36:03

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

cicelyzh

鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

MolEPI: 10
應(yīng)助: 1662 (講師)
金幣: 8693.8
紅花: 72
帖子: 3516
在線(xiàn): 456小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1614001
注冊(cè): 2012-02-13
專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)

★ ★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-08-27 22:23:46

不失活酶是可以的。電轉(zhuǎn)化的條件主要與轉(zhuǎn)化宿主與電轉(zhuǎn)化杯的尺寸有關(guān)，如果用2mm的杯子，大腸桿菌的條件是2.5kv（12.5kv/cm），5ms

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

4樓2013-08-27 22:08:09

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

weithermo

新蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 12.2
帖子: 9
在線(xiàn): 2.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2613891
注冊(cè): 2013-08-24

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

不用失活。為什么不用快速連接酶呢？賽默飛世爾有各種快速內(nèi)切和連接酶，NEB也有。你可以省很多時(shí)間，有花不了太多的錢(qián)。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

5樓2013-08-28 00:52:00

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

查看全部 12 個(gè)回答

普通表情龍兔虎貓高級(jí)回復(fù) (可上傳附件)

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專(zhuān)業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +6	yangfz 2026-03-17	6/300	2026-03-17 21:30 by hmn_wj
[考研] 能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名 +3	脫穎而出 2026-03-16	6/300	2026-03-17 21:19 by z1z2z3879
[考研] 293求調(diào)劑 +7	zjl的號(hào) 2026-03-16	12/600	2026-03-17 18:22 by 重科小霸王
[考研] 308求調(diào)劑 +4	是Lupa啊 2026-03-16	4/200	2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6	丶宏Sir 2026-03-13	6/300	2026-03-17 16:13 by 醉在風(fēng)里
[考博] 26申博 +4	八旬速覽 2026-03-16	4/200	2026-03-17 13:00 by 輕松不少隨
[考研] 考研調(diào)劑 +3	淇ya_~ 2026-03-17	5/250	2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 278求調(diào)劑 +3	Yy7400 2026-03-13	3/150	2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 一志愿華中師范071000，325求調(diào)劑 +6	RuitingC 2026-03-12	6/300	2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3	LJY9966 2026-03-15	5/250	2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 機(jī)械專(zhuān)碩調(diào)劑 +3	笨笨兔子 2026-03-12	3/150	2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 中科大材料專(zhuān)碩319求調(diào)劑 +3	孟鑫材料 2026-03-13	3/150	2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 285 求調(diào)劑資源與環(huán)境一志愿北京化工大學(xué) +3	未名考生 2026-03-10	3/150	2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4	快樂(lè)的香蕉 2026-03-11	4/200	2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 求調(diào)劑（材料與化工327） +4	愛(ài)吃香菜啦 2026-03-11	4/200	2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 求材料調(diào)劑 +5	隔壁陳先生 2026-03-12	5/250	2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 333求調(diào)劑 +3	球球古力 2026-03-11	3/150	2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 311求調(diào)劑 +3	冬十三 2026-03-13	3/150	2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5	周慢熱啊 2026-03-12	7/350	2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 289求調(diào)劑 +3	李政瑩 2026-03-12	3/150	2026-03-13 11:02 by 求調(diào)劑zz