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b_win銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
如何篩選帶菌毛的大腸桿菌,用于M13噬菌體感染
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使用M13制備單鏈探針,但是M13噬菌體僅感染帶菌毛的大腸桿菌。因此首先要篩選培養(yǎng)一批帶菌毛的大腸桿菌。 使用的菌株是JM109 Genotype( 基因型):end A1, rec A1, gyr A96, thi , hsd R17 (rk-, mk+),rel A1, sup E44, l-, △ (lac-pro AB), [F`, tra D36, pro AB, lac IqZ △ M15],lDE3。 根據(jù)分子克隆實驗指南 可以采用以下方法篩選: 1.使用M9基本培養(yǎng) 2.加入抗生素卡那霉素篩選 本人一開始使用卡那霉素篩選,但是均失敗告終。 然后使用M9固體培養(yǎng)基篩選方法,結(jié)果到現(xiàn)在還沒發(fā)現(xiàn)有菌落出現(xiàn) 怎么回事??? 有沒有做過的?? 請給一些意見。 任何有幫助的意見! 急! 謝謝。! |
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