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llyycc金蟲 (小有名氣)
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[求助]
重組載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌，目的片段小了什么原因？
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親愛的蟲友們， 為驗(yàn)證某一基因功能，將目的基因的ORF加雙酶切位點(diǎn)重組到PBI121載體上，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a，菌液pcr驗(yàn)證，同時(shí)提取質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切驗(yàn)證正確，且送測(cè)序目的片段無(wú)突變；此時(shí)，將驗(yàn)證正確的重組載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌（自己制備的感受態(tài)），培養(yǎng)長(zhǎng)斑后，挑取了12個(gè)單斑，進(jìn)行菌液PCR驗(yàn)證，結(jié)果目的片段小了，這是什么原因��？真是很苦惱，麻煩大家?guī)蛶兔玻?br /> 小蟲子甚是感謝�。“萃辛� |
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金蟲 (小有名氣)
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2樓2013-10-08 22:55:08
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