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[交流] 關于紙片法，菌懸液濃度

如題，紙片法測抑菌性實驗中，文獻上說菌懸液要達到0.5麥氏濁度，這是一個標準。想請教各位，在沒有濁度儀，紫外可見分光光度計正在修的情況下，怎么測量菌液達到0.5麥氏濁度標準？請說的詳細一點，拜謝。

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1樓 2013-09-06 10:45:38

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bobovichy

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laozuzunzhe: 金幣+1, 鼓勵交流！ 2013-09-06 22:07:42

不解，當時做抑菌實驗的時候沒有那么嚴格，直接挑取菌落按一定倍數(shù)稀釋，涂布后貼紙片進行實驗了。

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2樓2013-09-06 11:27:54

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skpom

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laozuzunzhe: 金幣+4, 鼓勵熱心交流！ 2013-09-06 22:07:13

麥氏濁度標準
（1）將0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L （0.36N）的H2SO4(1%v/v)中并不斷攪動以維持混懸狀態(tài)。
（2）按每管4-6mL將硫酸鋇懸液分裝于帶懸蓋的管子中，管子尺寸應與培養(yǎng)或稀釋接種菌所用的管子一致。
（3）這些管子應密封并貯存于室溫避光處。
（4）每次使用前，應將濁度標準管置于旋轉(zhuǎn)混勻器上劇烈振動，目測其外觀濁度應均勻一致。若有大顆粒出現(xiàn)，此標準管應更換。
（5）使用前核實其正確濃度，每個月都應證實或更換。濁度標準的正確濃度應使用分光光度計測定吸光度核實。該分光光度計光徑為1cm，并配有合適的比色杯。0.5號麥氏標準管在625nm處的吸光度值應為0.08-0.10。

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3樓2013-09-06 11:29:19

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ssfengtian

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2樓: Originally posted by bobovichy at 2013-09-06 11:27:54
不解，當時做抑菌實驗的時候沒有那么嚴格，直接挑取菌落按一定倍數(shù)稀釋，涂布后貼紙片進行實驗了。

那是選擇哪個倍數(shù)涂布的呢？還是所有倍數(shù)都涂？

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4樓2013-09-09 08:18:55

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ssfengtian

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3樓: Originally posted by skpom at 2013-09-06 11:29:19
麥氏濁度標準
（1）將0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L （0.36N）的H2SO4(1%v/v)中并不斷攪動以維持混懸狀態(tài)。
（2）按每管4-6mL將硫酸鋇懸液分裝于帶懸蓋的管子中，管子尺 ...

這個地球人都知道，你沒有理解我的問題

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5樓2013-09-09 08:21:17

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mizhoulong

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ssfengtian: 金幣+10 2013-09-10 08:14:55

去梅里埃公司買比濁管，國產(chǎn)也有，玻璃封好的，很便宜，可以一直用下去

目測比對。

還有一個招，培養(yǎng)18-24的大腸桿菌，10E9 CFU/mL差不多是一個麥氏濃度，其他細菌會有出入，

其實這個濃度不是絕對的，上下波動些，不會影響很大

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6樓2013-09-09 08:50:26

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4樓: Originally posted by ssfengtian at 2013-09-09 08:18:55
那是選擇哪個倍數(shù)涂布的呢？還是所有倍數(shù)都涂？...

問得好，這個記不得了，查一查微生物實驗，肯定都有詳細過程。

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7樓2013-09-09 08:51:51

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6樓: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-09 08:50:26
去梅里埃公司買比濁管，國產(chǎn)也有，玻璃封好的，很便宜，可以一直用下去

目測比對。

還有一個招，培養(yǎng)18-24的大腸桿菌，10E9 CFU/mL差不多是一個麥氏濃度，其他細菌會有出入，

其實這個濃度不是絕對的，上下 ...

目測比對啊，果然就是用肉眼看啊，誤差會不會很大啊，我看文獻上說濃度影響有一定關系的，會出現(xiàn)假耐藥和假抑制。。有沒有其他方法呢？

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8樓2013-09-10 08:14:46

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其他的方法就是用一個簡單的濁度儀了，買個單獨的濁度儀，應該很便宜吧。

梅里埃的Vitek系統(tǒng)自帶濁度儀，很簡單的，相信國產(chǎn)會有替代品，估計千把元錢或者幾百塊就能搞定

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9樓2013-09-10 10:36:10

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9樓: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-10 10:36:10
其他的方法就是用一個簡單的濁度儀了，買個單獨的濁度儀，應該很便宜吧。

梅里埃的Vitek系統(tǒng)自帶濁度儀，很簡單的，相信國產(chǎn)會有替代品，估計千把元錢或者幾百塊就能搞定

嗯，謝謝

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10樓2013-09-10 17:40:09

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