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cicicanfly新蟲 (初入文壇)
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[求助]
LDH檢測相關(guān)~
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南京建成的LDH試劑盒，檢測細(xì)胞中LDH釋放率 說明書提供了公式，一個(gè)是血清的一個(gè)是組織的，那么我想測細(xì)胞的需要用哪個(gè)呢？還是均用不上 |
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阿飛1990乖乖
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專家經(jīng)驗(yàn): +131 - 應(yīng)助: 61 (初中生)
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2樓2014-05-26 10:03:02
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乳酸脫氫酶(LDH)釋放實(shí)驗(yàn) （1） HK-2細(xì)胞以2x105/孔濃度接種于24孔板； （2） 實(shí)驗(yàn)前換無血清DMEM/F12培養(yǎng)液孵育24 h，使細(xì)胞同步于靜止期； （3） 當(dāng)HK-2細(xì)胞生長至65%～75%融合時(shí)，棄上清液，加入含不同濃度AA（ 0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml）的無血清DMEM/F12培養(yǎng)液0.5ml； （4） 孵育細(xì)胞48 h后，吸取培養(yǎng)上清入1.5ml Ep管中待測； （5） 用冷PBS液清洗細(xì)胞2～3次，將冷2%TritonX-100 0.5 ml加入各孔中，反復(fù)凍融吹打3次使細(xì)胞充分破裂溶解； （6） 吸取細(xì)胞裂解液入1.5ml Ep管中12000g（相當(dāng)于12300ref）離心3min。取上清入另一1.5ml Ep管中。應(yīng)用全自動生化分析儀檢測該上清液LDH值（即細(xì)胞內(nèi)的LDH值）和上述培養(yǎng)上清液中的LDH值； （7） 計(jì)算各組LDH釋放率： LDH釋放率(%)＝上清液LDH值x 100/（細(xì)胞內(nèi)LDH值十上清液LDH值）。 我知道就這么多了，，如果你有更具體的麻煩你告知一下我 |
3樓2014-08-04 01:09:29
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乳酸脫氫酶(LDH)釋放實(shí)驗(yàn) （1） HK-2細(xì)胞以2x105/孔濃度接種于24孔板； （2） 實(shí)驗(yàn)前換無血清DMEM/F12培養(yǎng)液孵育24 h，使細(xì)胞同步于靜止期； （3） 當(dāng)HK-2細(xì)胞生長至65%～75%融合時(shí)，棄上清液，加入含不同濃度AA（ 0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml）的無血清DMEM/F12培養(yǎng)液0.5ml； （4） 孵育細(xì)胞48 h后，吸取培養(yǎng)上清入1.5ml Ep管中待測； （5） 用冷PBS液清洗細(xì)胞2～3次，將冷2%TritonX-100 0.5 ml加入各孔中，反復(fù)凍融吹打3次使細(xì)胞充分破裂溶解； （6） 吸取細(xì)胞裂解液入1.5ml Ep管中12000g（相當(dāng)于12300ref）離心3min。取上清入另一1.5ml Ep管中。應(yīng)用全自動生化分析儀檢測該上清液LDH值（即細(xì)胞內(nèi)的LDH值）和上述培養(yǎng)上清液中的LDH值； （7） 計(jì)算各組LDH釋放率： LDH釋放率(%)＝上清液LDH值x 100/（細(xì)胞內(nèi)LDH值十上清液LDH值）。 我知道就這么多了，，如果你有更具體的麻煩你告知一下我 |
4樓2014-08-04 01:09:46
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5樓2014-08-04 05:39:26
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