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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » RT-PCR
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[求助]
RT-PCR
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| 請教下各位大神，是是做realtimePCR之前要先做RT-PCR呀？做半定量和全定量PCR的前提是什么呢？ |
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木蟲 (正式寫手)
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵回帖應助！ 2013-09-11 19:39:20
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵回帖應助！ 2013-09-11 19:39:20
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realtime PCR即實時熒光定量PCR，模板需要是雙鏈核酸分子�？茨愕男枰e例說明：如果直接檢測基因，利用DNA為模板，則不需要RT-PCR；如果是研究轉(zhuǎn)錄水平，則需要提取RNA先進行RT-PCR得到雙鏈核酸分子，才能進行后續(xù)實驗。 半定量和定量PCR的前提？看你自己的需要了。 半定量是指設定內(nèi)參，以內(nèi)參為標準，同時進行定量PCR，通過與內(nèi)參的Ct值對比，來達到目的基因定量的目標。 定量PCR是指首先得到嚴格意義的1拷貝，2拷貝...的模板，然后制作標準曲線（此時需要做到擴增效率100%）；然后再進行研究樣本的定量PCR，通過標準曲線計算，來達到目的基因定量的目標。 個人見解，共參考。 |
2樓2013-09-11 15:10:01
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