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395526304銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
酶聯(lián)免疫 花生過敏原雙抗夾心 消除基質(zhì)影響
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我做的實(shí)驗(yàn)是 花生過敏原酶聯(lián)免疫方法的建立 方法雙抗夾心 包被兔抗 花生蛋白濃度4ppm開始，1.5倍梯度，檢測(cè)抗體是鼠抗，檢測(cè)限LOD為50ppb。 現(xiàn)在在做添加回收，基質(zhì)是 牛奶、面包、餅干。1g基質(zhì)加入5mlpbs ，再分別添加200ppb、500ppb、1ppm。10000轉(zhuǎn)離心20min，過0.45的水膜，然后加樣。 回收率=實(shí)際值/添加值。 添加200ppb的回收率200%，500ppb回收率1000%，1ppm回收率2000%,基質(zhì)影響很大。 我們要求回收率在80-120%。 請(qǐng)問如何消除基質(zhì)影響。 有人告訴我，用75%酒精沉淀蛋白后再添加，可是具體操作我也不會(huì)，求指導(dǎo)，謝謝。 |
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