| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2439 | 回復(fù): 12 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
冰凝東金蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
擬南芥突變體純合子目的基因仍有表達(dá)!真心求助! 已有1人參與
|
|
| 購(gòu)買(mǎi)的擬南芥T-DNA插入突變體(SALK and CS),T-DNA插入在啟動(dòng)子或者內(nèi)含子區(qū)域都有,提取DNA經(jīng)PCR鑒定出純合子,但是以純合子cDNA為模板進(jìn)行PCR,仍然可以獲得目的基因片段(已測(cè)序確定),引物是夸內(nèi)含子區(qū),且RNA做了DNA酶消化!幾個(gè)突變體都是這樣,不知道大家有么有類(lèi)似經(jīng)歷,都快郁悶死了,老板天天罵,說(shuō)是我的問(wèn)題!真心請(qǐng)教高手解決問(wèn)題……現(xiàn)行謝過(guò)…… |
金蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
突變體可以上TAIR查看, 在sequence viewer里面選你要看的基因區(qū)域就可以看到突變體的插入位置. 因?yàn)镾ALK/SAIL一直在更新的, 或許現(xiàn)在有在EXON插入的T-DNA. T-DNA 大小一般10k 左右(把篩選標(biāo)記的大小也算進(jìn)去). 所以當(dāng)T-DNA出現(xiàn)在基因里面時(shí),轉(zhuǎn)錄的時(shí)候是完全可能把整個(gè)T-DNA一起轉(zhuǎn)錄出來(lái)再接著轉(zhuǎn)錄基因剩下的部分的(雖然TDNA里面自帶轉(zhuǎn)錄終止片段的). 啟動(dòng)子一般認(rèn)為是在轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)前面2到3k的范圍里面, 但是這只是一個(gè)很模糊的定義. 因?yàn)樨?fù)責(zé)基因表達(dá)的啟動(dòng)子可以出現(xiàn)在基因里面(比如說(shuō)AGAMOUS, 它的啟動(dòng)子在intron里面), 甚至3'的地方. |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +4 | 薛定諤的虎。 2026-04-01 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 素年祭語(yǔ) 2026-03-31 | 15/750 |
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +11 | 一樣YWY 2026-03-31 | 11/550 |
|
|
[考研] 材料專碩調(diào)劑 +17 | 椰椰。 2026-03-29 | 17/850 |
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +11 | yelck 2026-04-01 | 12/600 |
|
|
[考研] 材料專業(yè)調(diào)劑 +5 | 啦啦啦哭 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
[考研] 0703一志愿南師大334求調(diào)劑 +4 | seven7yu 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
[考研] 生物學(xué)327,求調(diào)劑 +4 | 書(shū)上的梅子 2026-04-01 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿 南京航空航天大學(xué) ,080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +7 | @taotao 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +7 | hanamiko 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
[考研] 考研生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +7 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
[考研] 0856材料與化工調(diào)劑,339 +10 | 10213207 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
[考研] 材料工程085601數(shù)二英一335求調(diào)劑 +5 | 雙馬尾痞老板2 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
[考研] 調(diào)劑求院校招收 +7 | 鶴鯨鴿 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑(331分) +8 | 111@127 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +5 | 亞克西good 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +10 | 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
[考研] 085600,材料與化工321分求調(diào)劑 +10 | 大饞小子 2026-03-28 | 10/500 |
|
|
[考研] 085600,專業(yè)課化工原理,321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|