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鏈接轉(zhuǎn)化致使T5工具質(zhì)粒斷裂并且重新鏈接，求分析
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我做的是含有DUTP的非對稱PCR，產(chǎn)物進(jìn)行鏈接轉(zhuǎn)化后，用M13引物檢測電泳無結(jié)果，且在加入孔有亮斑，測序結(jié)果顯示，質(zhì)粒從鏈接位置（293bp）斷裂開，但是沒有新片段接入，而且不但沒有接入，從鏈接位置開始，之后的1880bp丟失，從1881的地方又與之前的293bp位置鏈接。致使整個(gè)M13下游引物位置全部丟失，當(dāng)然這也就是為啥電泳無結(jié)果的原因。 就現(xiàn)在質(zhì)粒斷裂有重新鏈接的結(jié)果，找不出一個(gè)合理的原因，希望有過類似經(jīng)歷的大神給予指點(diǎn)。 |
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