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wangzunchen

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[交流] 大孔樹(shù)脂和聚酰胺的使用

本人現(xiàn)在在使用大孔樹(shù)脂和聚酰胺來(lái)純化一種苷類物質(zhì)，現(xiàn)在有幾個(gè)問(wèn)題需要請(qǐng)教
1 大孔吸附樹(shù)脂和聚酰胺與提取物的比例問(wèn)題，1g提取物需要用多少g大孔或者聚酰胺啊。
2 提取物溶液上樣濃度問(wèn)題，樹(shù)脂正好能吸附1g提取物的前提下，1g提取物溶解在10ml溶劑中和20ml中上樣效果一樣嗎，20ml時(shí)上樣回吸附完全嗎，
3 樹(shù)脂正好能吸附提取物的前提下，裝柱的徑高比對(duì)吸附影響大不大。
4 加入10%乙醇可以洗脫雜質(zhì)，之前還需要純水洗柱嗎
希望各位幫助一下，回答好的必有重謝。
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[ Last edited by wangzunchen on 2013-9-30 at 14:08 ]

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1樓 2013-09-30 13:44:00

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wangzunchen

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引用回帖:

2樓: Originally posted by hyf110 at 2013-09-30 14:32:30
1.不同型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂，由于其極性、孔徑、比表面積等因素的差別，其吸附量和吸附率是不同的，同時(shí)，和你所說(shuō)的提取物中苷類物質(zhì)的含量以及提取物的粗體程度有關(guān)。但是一般上樣量和樹(shù)脂量比為1:6-1:10就能達(dá)到吸 ...

不好意思，想多發(fā)給你金幣的，但每次只能10個(gè)，
對(duì)于問(wèn)題4，也就是說(shuō)水洗是必不可少的，如果我只需要30%組分，那么后面的色譜柱處理可以用乙醇直接洗脫嗎

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5樓2013-09-30 15:24:20

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hyf110

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
wangzunchen: 金幣+10 2013-09-30 15:19:26
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-10-01 08:33:00

1.不同型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂，由于其極性、孔徑、比表面積等因素的差別，其吸附量和吸附率是不同的，同時(shí)，和你所說(shuō)的提取物中苷類物質(zhì)的含量以及提取物的粗體程度有關(guān)。但是一般上樣量和樹(shù)脂量比為1:6-1:10就能達(dá)到吸附飽和。建議大量處理樣品之前做預(yù)實(shí)驗(yàn)，先計(jì)算吸附量和吸附率，以及洗脫量、洗脫率等。聚酰胺相似。

2。如果1g提取物能溶解在10ml溶劑中，那么絕不用20ml溶解，因?yàn)槿軇┨嘈孤肚€會(huì)更早或提前出來(lái)。影響樣品的吸附。

3.徑高比和柱效是成正比的，柱子越細(xì)越長(zhǎng)，塔板數(shù)越多，柱效越高，但洗脫流速相應(yīng)越慢，洗脫時(shí)間越長(zhǎng)，死吸附也會(huì)越嚴(yán)重。對(duì)大孔樹(shù)脂來(lái)說(shuō)，畢竟是一個(gè)粗分離過(guò)程，建議用一較粗的柱子進(jìn)行分離。

4.再用乙醇洗脫之前，最好用純水多沖幾個(gè)柱體積，盡量除掉大極性的東西，尤其像糖類，會(huì)對(duì)后面的乙醇洗脫有無(wú)限大的好處。

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2樓2013-09-30 14:32:30

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xurui_86

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
wangzunchen: 金幣+3, 謝謝參與 2013-09-30 15:24:42
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-10-01 08:33:04

樓上回答得很詳細(xì)，贊一個(gè)。祝樓主好運(yùn)�。�！

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3樓2013-09-30 14:40:46

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wangzunchen

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謝謝你的回復(fù)，對(duì)我?guī)椭艽螅瑤臀医鉀Q了不少疑惑

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4樓2013-09-30 15:18:36

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