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[求助]
有關(guān)熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的問題。
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大家好！我剛接觸熒光分光光度法不久，激發(fā)光譜和發(fā)射光譜存在一些疑問，參閱了一些參考書和文獻(xiàn)，但還是感覺沒懂透徹，現(xiàn)將我自己的理解表述如下，請大伙幫我看看是否理解正確。謝謝！ 1、激發(fā)光譜：由于光譜是量子化的，所以每個(gè)激發(fā)峰對(duì)應(yīng)于一個(gè)激發(fā)態(tài)的振動(dòng)能級(jí)，而這個(gè)激發(fā)峰的縱坐標(biāo)則反映了到達(dá)這個(gè)振動(dòng)能級(jí)的電子數(shù)目的多少，或者說概率的大小。比如說激發(fā)波長在300nm處出現(xiàn)了最大激發(fā)峰，則表明了用300nm的光照射待測物后，到達(dá)相對(duì)應(yīng)的激發(fā)態(tài)振動(dòng)能級(jí)上的電子最多。 2、發(fā)射光譜：它的波形只跟基態(tài)振動(dòng)能級(jí)的分布有關(guān)。同樣道理，每個(gè)發(fā)射峰對(duì)應(yīng)于一個(gè)基態(tài)的振動(dòng)能級(jí)，橫坐標(biāo)表示不同熒光的波長，縱坐標(biāo)反映了發(fā)射出對(duì)應(yīng)波長熒光的電子數(shù)的多少。 另外，確定某種物質(zhì)的激發(fā)和發(fā)射波長基本要經(jīng)歷以下步驟，如下描述也是我自己的理解，請大家看下是否正確： 首先掃紫外，確定激發(fā)波長，在該激發(fā)波長下掃發(fā)射光譜：由于最大激發(fā)波長下躍遷至相應(yīng)激發(fā)態(tài)振動(dòng)能級(jí)的電子數(shù)最多，所以選擇這個(gè)波長是為了是讓大部分電子處于激發(fā)態(tài)，從而提高熒光的產(chǎn)生效率； 現(xiàn)在的問題是，得到最大發(fā)射波長后再掃激發(fā)光譜是什么意思呢？電子都已經(jīng)回基態(tài)了，又激發(fā)它們一遍嗎？發(fā)射峰反映的是基態(tài)的情況，而激發(fā)峰反映的是激發(fā)態(tài)的情況，此時(shí)用最大發(fā)射波長來掃激發(fā)的目的是什么？ 還有一個(gè)問題是：三維熒光技術(shù)是不是可以省略掉以上的步驟呢？設(shè)定好激發(fā)和發(fā)射波長及掃描范圍（數(shù)值參考相關(guān)文獻(xiàn)后設(shè)定）就可以直接掃描得到立體圖了？ 問題比較多和繁瑣，也是自己思考了很久才得出的，為此都沒睡好覺（請看我的發(fā)帖時(shí)間。。），希望能換回大家一個(gè)合理的解答，在此跪謝大家！ |
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zyhappy
新蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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小木棉要努力(release53代發(fā)): 金幣+5, O(∩_∩)O謝謝 2013-10-28 10:57:19
小木棉要努力: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝你的回答，很有助于我的理解 2013-10-30 11:05:33
小木棉要努力(release53代發(fā)): 金幣+5, O(∩_∩)O謝謝 2013-10-28 10:57:19
小木棉要努力: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝你的回答，很有助于我的理解 2013-10-30 11:05:33
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二維光譜： 1、首先測紫外吸收光譜。得到的峰是該物質(zhì)的最大吸收； 2、測發(fā)射光譜。上述得到的最大吸收作為激發(fā)波長，會(huì)得到一個(gè)最大發(fā)射峰（可暫時(shí)理解為最佳發(fā)射）； 3、測激發(fā)光譜。上述得到的最大發(fā)射峰作為固定波長，掃描激發(fā)光譜，得到一個(gè)激發(fā)峰（可暫時(shí)理解為最佳激發(fā)波長）。之所以說是暫時(shí)，是因?yàn)槿粢玫捷^準(zhǔn)確的激發(fā)、發(fā)射峰，需要上述2、3步反復(fù)測，直到所得的激發(fā)峰、發(fā)生峰的位置不變。 就是說，用最大發(fā)射波長掃描激發(fā)目的就是確定該物質(zhì)的最佳激發(fā)波長。 三維光譜掃描像你說的那樣。當(dāng)然吸收是沒有的了。 |
2樓2013-10-25 16:40:41
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牟子_muzi
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7樓2016-11-28 21:19:55
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