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michaelzang木蟲 (小有名氣)
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[求助]
脂質(zhì)體的制備---薄膜分散的困惑
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各位脂質(zhì)體達(dá)人，大家好： 我現(xiàn)在正在制備脂質(zhì)體，期間遭遇了不少問題，希望大家不吝賜教給我這個(gè)笨人予以解惑。我是采用普通磷脂和膽固醇進(jìn)行處方篩選，主要考察粒徑穩(wěn)定性等，而包封率藥物釋放等，由于后期需要用其他功能磷脂予以替換，故不予考察。此外，由于考慮到后期的功能磷脂替換后，考察脂質(zhì)體用量較小，故所用磷脂膽固醇用量較小。磷脂用氯仿溶解配成10mg/ml的儲(chǔ)備液，膽固醇為5mg/ml的氯仿儲(chǔ)備液，儲(chǔ)存時(shí)置于-20℃冰箱貯存。制備脂質(zhì)體時(shí)，按照質(zhì)量比磷脂/膽固醇=2：1，3：1 , 4:1 , 5:1 ，6:1 其中磷脂質(zhì)量約為10mg,膽固醇為相應(yīng)的質(zhì)量，按照處方量取磷脂、膽固醇儲(chǔ)備液加入50ml茄型瓶中，再加入3ml的氯仿，于37℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜除氯仿，待茄型瓶中見不到明顯氯仿液體的時(shí)候，再旋蒸30~60min 后 , 將水化溫度升至50℃加入3ml的PBS水化，遇見的問題就出現(xiàn)了，根本水化不下來，后來改用稀釋10倍的PBS和水水化也是相當(dāng)困難，并且水化下來的脂質(zhì)體溶液中有絮狀的沉淀。望達(dá)人們路見不平一聲吼，指出我的問的問題所在，謝謝大家！ PS: PBS的配方： NaCl 8 g KCl 0.2 g Na2HPO4.12H2O 2.9 g KH2PO4 0.2 g _________________________________________________ 加蒸餾水 1000ml [ Last edited by michaelzang on 2013-10-9 at 10:03 ] |
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michaelzang: 金幣+5, ★有幫助, 謝謝你的回復(fù) 2013-10-09 16:33:40
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薄膜分散法是制備脂質(zhì)體最經(jīng)典的方法，該方法是將磷脂材料溶解在適當(dāng)有機(jī)溶劑中，經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑而形成磷脂膜，最后經(jīng)水化即可得到脂質(zhì)體。但這樣的脂質(zhì)體往往粒徑較大而且分布不均勻。為了改善這一缺陷，在磷脂膜水化時(shí)常常采取探頭超聲、微射流、高壓均質(zhì)、加壓擠出等手段來使脂質(zhì)體粒徑分布更加均勻。 你覺得呢？我不知道我說的對(duì)不對(duì)。你需要超聲。 |
2樓2013-10-09 14:37:42
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michaelzang: 金幣+15, ★★★很有幫助 2013-12-11 17:13:53
| 不知道你的問題解決了沒有，應(yīng)該已經(jīng)解決了吧？~我也是做脂質(zhì)體的，我覺得水化不下來是正常的，我每次水化完會(huì)水浴超聲20S左右，把膜超下來，然后探頭超聲細(xì)化，做出的脂質(zhì)體穩(wěn)定性在8個(gè)月以上~ |
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michaelzang5樓2013-12-02 20:31:50
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