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α-葡萄糖苷酶抑制劑的篩選模型問題 已有1人參與
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| 大家好,我正做關(guān)于抑制劑對α-葡萄糖苷酶的抑制效應(yīng),我正打算先做個初篩,也看了有關(guān)方面的文獻,具體步驟都很含糊,包括酶和底物的稀釋濃度、具體的用量,反應(yīng)時間,用什么樣的磷酸鹽緩沖液以及其PH,都沒有準(zhǔn)確的統(tǒng)一的數(shù)據(jù),想問下做過的蟲友們,我現(xiàn)在只是簡單的初篩,能否酶和底物都先用最大的劑量,我想只有這樣才能保證初篩的準(zhǔn)確性,我想做PNPG為底物的篩選模型,我還想問還要不要聯(lián)合其他的酶抑制劑篩選模型,以防止漏篩,還必須做陽性對照嗎?我這樣簡單的初篩有必要做酶反應(yīng)體系正交優(yōu)化嗎?(優(yōu)化方面包括:酶濃度、底物濃度、溫度、PH、抑制劑濃度、抑制劑作用時間),謝謝親們提出寶貴的意見! |
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