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daiti鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
請教PD10柱子的使用方法和購買途徑
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最近要測一個酶活，參考文獻(xiàn)中大多提到用PD10柱對酶提取液進(jìn)行脫鹽處理，還有的文獻(xiàn)中提到用Sephadex G-50。本人沒有用過這種方法，參考文獻(xiàn)中又都是寥寥數(shù)語，讓人摸不著門路，故特來貴寶地請教幾個問題： 1、PD10柱子中所用的填料是不是就是Sephadex G-50？ 2、有用過的前輩，懇請?zhí)峁┹^為詳細(xì)的使用步驟說明，及注意事項，不勝感激。 3、國內(nèi)在哪里可以買得到這個柱子？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
daiti: 金幣+10, ★★★★★最佳答案, 非常感謝！ 2013-10-24 08:18:02
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PD-10預(yù)裝脫鹽柱，GE公司的產(chǎn)品，預(yù)裝填料為Sephadex G-25。 用法很簡單: 1）平衡PD-10柱，可以用純水，也可以用適宜的緩沖液，視脫鹽的目的而定。 2）上樣，在柱子平衡后，將樣品（1.5-2.5ml）加到柱子頂上。 3）洗脫，樣品全部進(jìn)入柱子內(nèi)后，柱頂加入水或適宜緩沖液洗脫。（自然流速） 從加樣開始計算，收集2.5~5.5ml的流出液為脫鹽蛋白峰。 如果不放心，上樣，洗脫，用EP管每管收集1ml，經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測后，再合并樣品液。 4）過柱后，充分洗滌，用20%乙醇、0.05%NaN3或0.05mol/L NaOH保存柱子。 |
4樓2013-10-23 19:11:01
daiti
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2樓2013-10-22 10:58:14
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3樓2013-10-23 14:18:14
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5樓2013-11-16 11:05:43
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