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dewdan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
超濾管
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| 各位蟲友們,我第一次用超濾管,50KDa的,是將大腸桿菌菌體細胞破碎后離心取上清超濾,不慎離心不完全膜有點堵住了,然后膜超聲清洗了接著用了。。。但是超濾完的東西跑SDS-PAGE膠看了一下膜上的蛋白全都有,50以下的也有,膜下什么蛋白都沒有,這不是沒起到篩分的效果嗎?膜被堵了是不是就不能再用啦?? |
分子生化實驗經驗積累 |
金蟲 (著名寫手)

金蟲 (著名寫手)

新蟲 (小有名氣)

木蟲 (小有名氣)
| 超濾管沒有篩分的功能。截留分子量50KD,并不是說50KD以下的就會流過去。截留分子量50KD,是平均孔徑,一般60KD以上的蛋白能被完全截留,但是小分子量的蛋白不一定穿過去,小分子量的蛋白會在孔上架橋,堵孔,使孔徑變小甚至完全堵住。舉個例子,淘米的簍篩孔很小,但是我拿更細小的沙子裝滿,沙子不會全部漏出去,剛開始漏一點,后面就不漏下去了。 |
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