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小木蟲論壇-學(xué)術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 超濾管
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dewdan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
超濾管
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| 各位蟲友們，我第一次用超濾管，50KDa的，是將大腸桿菌菌體細胞破碎后離心取上清超濾，不慎離心不完全膜有點堵住了，然后膜超聲清洗了接著用了。。。但是超濾完的東西跑SDS-PAGE膠看了一下膜上的蛋白全都有，50以下的也有，膜下什么蛋白都沒有，這不是沒起到篩分的效果嗎？膜被堵了是不是就不能再用啦？？ |
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dewdan
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| 超濾管沒有篩分的功能。截留分子量50KD，并不是說50KD以下的就會流過去。截留分子量50KD，是平均孔徑，一般60KD以上的蛋白能被完全截留，但是小分子量的蛋白不一定穿過去，小分子量的蛋白會在孔上架橋，堵孔，使孔徑變小甚至完全堵住。舉個例子，淘米的簍篩孔很小，但是我拿更細小的沙子裝滿，沙子不會全部漏出去，剛開始漏一點，后面就不漏下去了。 |
4樓2013-10-23 13:26:53
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