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bayu18新蟲 (正式寫手)
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[求助]
熒光顯微鏡
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| 我用熒光顯微鏡拍攝植物熒光照片,發(fā)現(xiàn)同一部位在低曝光值(200ms)和高曝光值(1s)時熒光的顏色有點不同,這是什么原因?哪一個才是比較準確的? |
榮譽版主 (知名作家)
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不同樣品的熒光強度不一樣,所以需要的曝光時間各不相同。合適的曝光時間,以能看清所需要的細節(jié)為宜,在此前提下曝光時間越短越好。過長的曝光時間成像容易模糊,并且容易使樣品熒光淬滅。 另外,如果同時有多種熒光蛋白,過強的曝光時間可能導致其他顏色的熒光也顯現(xiàn)出來。我自己就同時拍過帶紅色和綠色熒光的樣品,本來濾光片用的是綠色熒光的,結果紅色熒光蛋白表達太強,看綠色熒光時竟然也同時能看到紅色。 樓主的圖片我看是亮度的問題,不用糾結顏色,哪個更能清楚顯示你要拍的部位,就選哪一個,F(xiàn)在大部分顯微鏡拍出來的其實都是黑白圖像,顏色都是軟件根據(jù)設置加上去的偽色,并且可以更改的,所以不要在意顏色啦。 樓主先弄清楚自己需要看的地方是哪里,然后再根據(jù)上面說的調節(jié)曝光時間就可以了。原則其實就一個:看清你需要的細節(jié)。 |
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