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tianxia119wo金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
液相樣品溶解
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樣品一般選擇流動(dòng)相溶解，這是在流動(dòng)相可以溶解樣品的前提下。 當(dāng)樣品在流動(dòng)相中溶解度不好的時(shí)候，我們有時(shí)要選擇稀釋劑。 以前自己碰到過(guò)自己流動(dòng)相為5%的乙腈，而選擇50%乙腈稀釋樣品，這樣會(huì)出現(xiàn)純樣品出雙峰。解釋【 溶劑極性及進(jìn)樣量 許多hplc分析者對(duì)此可能不以為然，一般的hplc的書(shū)籍和文獻(xiàn)都不會(huì)提到這方面的內(nèi)容，而這確是雙峰產(chǎn)生的一個(gè)很重要的原因。目前hplc分析多為反相色譜，流動(dòng)相多為甲醇、乙腈、水，加各種添加劑以改善分離性能。樣品一般用與流動(dòng)相相溶的溶劑溶解。最佳的溶解方法是用流動(dòng)相溶解，但是很多情況是不一致的。當(dāng)用溶劑極性強(qiáng)度大的試劑，如純甲醇、純乙腈，純乙醇，而分析體系中以水為主，樣品進(jìn)樣量大，如定量管為20ul，此條件下完全可以肯定，單一的純物質(zhì)出雙峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一樣），且拖尾，保留時(shí)間會(huì)提前(相對(duì)進(jìn)樣量少而言)，將進(jìn)樣量減少一半以上，峰型將變?yōu)檎�。這是樣品的溶劑與流動(dòng)相極性相差太大，而流動(dòng)相來(lái)不及將其稀釋達(dá)到平衡造成的。上面提到進(jìn)樣量造成雙峰的一個(gè)原因，另一個(gè)原因是，進(jìn)樣量不一定大，但絕對(duì)量很大，色譜圖上的雙峰緊靠在一起，基本上齊高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色譜柱問(wèn)題）。將樣品稀釋再進(jìn)樣就可以了，這是由于進(jìn)樣量過(guò)大，色譜柱過(guò)載造成的。】 |
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tianxia119wo
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| 這個(gè)造成自己后面樣品溶解時(shí)，首先選擇加入流動(dòng)相，不能溶解的話加入乙腈輔助溶解。直到自己做一個(gè)在流動(dòng)相溶解性很差的樣品時(shí)，過(guò)濾后進(jìn)樣，峰面積明顯偏小，合成方面的人說(shuō)應(yīng)該不含無(wú)機(jī)鹽，自己嘗試選擇用全部有機(jī)相溶解，發(fā)現(xiàn)出得是單峰，峰面積也正常了。看來(lái)稀釋劑和流動(dòng)相極性差別很大有時(shí)候也會(huì)出單峰（不過(guò)自己這個(gè)物質(zhì)出峰時(shí)間在40min，上面那個(gè)出雙峰的物質(zhì)出峰時(shí)間為18min，也有一定關(guān)系。）。 |
2樓2013-10-24 10:19:28
tianxia119wo
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5樓2013-10-24 19:14:39
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