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anjing安靜新蟲 (小有名氣)
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[求助]
大蒜提取液做液相遇到的各種問(wèn)題
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大家好，關(guān)于液相我是新手。現(xiàn)在遇到了不少麻煩，大家先看圖 圖1是標(biāo)準(zhǔn)品圖譜 圖2是樣品圖 圖3 流動(dòng)相 梯度流動(dòng) 從標(biāo)品圖可以看出，我的目標(biāo)物質(zhì)是在5.122min處出峰，而樣品圖中，目標(biāo)物質(zhì)應(yīng)該是5.00min的那個(gè)峰，含量很少，基本被雜峰掩蓋了，而且分離度也存在一定的問(wèn)題。前處理?xiàng)l件是大蒜泥在90~100℃條件下水浴2h的提取物。問(wèn)題就是（1）考慮到雜質(zhì)峰大，分離度不高，液相前除雜是否能用超濾截留一下，目標(biāo)物質(zhì)分子量161.2，除掉大分子？（2）雖然使用的是甲醇和水的梯度流動(dòng)，但是沒(méi)有將目標(biāo)物質(zhì)與前后的峰分開，是不是可以直接采用定比例流動(dòng)相？PS：做液相是為檢測(cè)一下目標(biāo)物質(zhì)的含量。麻煩各位有經(jīng)驗(yàn)的蟲子指導(dǎo)，謝謝！ 圖1 標(biāo)準(zhǔn)品.png 圖2 樣品圖.png 圖3 流動(dòng)相.png [ Last edited by anjing安靜 on 2013-10-27 at 15:46 ] |
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2樓2013-10-27 21:32:48
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4樓2013-10-28 08:31:23
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6樓2013-10-28 10:55:25
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7樓2013-10-28 12:42:53
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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第一：進(jìn)樣前用超濾處理，應(yīng)該對(duì)液相的結(jié)果沒(méi)有大的改變，一些大分子在液相上本身不出峰。用超濾預(yù)處理會(huì)對(duì)色譜柱的壽命有好處； 第二：我覺(jué)得單單這種初提物用液相來(lái)定含量是不大現(xiàn)實(shí)的，成分本身就太復(fù)雜，還需要進(jìn)一步提純，再反過(guò)來(lái)看看該物質(zhì)的位置，調(diào)整液相條件； 第三：從目前的液相條件來(lái)看，調(diào)流動(dòng)相的比例應(yīng)該也不起很大的作用。建議換色譜柱，或是用乙腈做流動(dòng)相試一試，方法還要開發(fā)。 個(gè)人意見。 |
8樓2013-10-28 14:52:29
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