版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

登錄注冊

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進行實名認證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進行手機號驗證，感謝您的理解與支持！

24小時熱門版塊排行榜

北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

返回列表

南拳奶爸

金蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 593.1
帖子: 43
在線: 20.5小時
蟲號: 2216374
注冊: 2012-12-31
性別: GG
專業(yè): 水產(chǎn)生物免疫學(xué)與病害控制

[求助] 如何提高重組質(zhì)粒在宿主內(nèi)存在時間，即提高質(zhì)粒穩(wěn)定性

小弟最近做原核轉(zhuǎn)基因，電轉(zhuǎn)化細菌在LB AMP培養(yǎng)基中培養(yǎng)7小時后（菌液渾濁），通過PCR、跑膠發(fā)現(xiàn)重組質(zhì)粒丟失。而后通過提取質(zhì)粒，質(zhì)粒PCR，跑膠，發(fā)現(xiàn)無重組質(zhì)粒的條帶。
小弟求教如何降低質(zhì)粒的丟失率，延長重組質(zhì)粒在宿主內(nèi)存在時間。
注：載體質(zhì)粒為pet32a ，宿主菌也不能更換。
希望大牛賜教啊

[ Last edited by 南拳奶爸 on 2013-10-31 at 16:42 ]

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

288資源與環(huán)境專碩求調(diào)劑，不限專業(yè)，有學(xué)上就行已經(jīng)有20人回復(fù)
311（085601）求調(diào)劑已經(jīng)有11人回復(fù)
材料調(diào)劑已經(jīng)有12人回復(fù)
一志愿南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩已經(jīng)有3人回復(fù)
0856材料與化工調(diào)劑，339 已經(jīng)有6人回復(fù)
08工科275分求調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
334分一志愿武理-080500 材料求調(diào)劑已經(jīng)有10人回復(fù)
324分 085600材料與化工已經(jīng)有7人回復(fù)
各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專碩已經(jīng)有11人回復(fù)
309求調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)

1樓 2013-10-31 16:36:51

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

大鵬鳥100

木蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 1846.1
紅花: 5
帖子: 1259
在線: 260.4小時
蟲號: 123455
注冊: 2005-12-05
性別: GG
專業(yè): 腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移

【答案】應(yīng)助回帖

應(yīng)該不會啊，一般用的感受態(tài)菌都是基因工程改造過的，已經(jīng)是延長DNA在其體內(nèi)的存在時間了。
考慮：1、改變一下轉(zhuǎn)化方法，用普通的熱休克法。
2、懷疑你培養(yǎng)基中的抗生素是否有效
3、如果是要大量提取質(zhì)粒，還是先劃個平板吧，挑菌，1ml，200ml，逐步擴大，轉(zhuǎn)化完了就擴大培養(yǎng)，質(zhì)量不好。

贊一下

回復(fù)此樓

2樓2013-11-02 15:06:44

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主南拳奶爸的主題更新