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[求助]
求助如何去除脂蛋白中的triton-X114
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| 最近在用triton-X114提取分離膜蛋白：結(jié)果做western蛋白變性時(shí), detergent 層的蛋白煮完后很粘稠，上樣感覺有油塊狀，跑出來的條帶也拖尾嚴(yán)重。后面想先用丙酮變性 detergent 層蛋白，將triton114去掉，再用蛋白溶解液復(fù)溶蛋白，但老是溶解不完全，蛋白損失嚴(yán)重。請(qǐng)問哪位高手能指導(dǎo)下：如何 去掉detergent 層蛋白中的tritonX114和氯化鈉，又能減少蛋白的損失和不可逆變性? |
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3樓2013-11-01 08:27:46
cicelyzh
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| triton x-114層主要是膜蛋白，變性時(shí)不宜煮，否則會(huì)變粘稠。你可以用丙酮沉淀除去detergent，不過，triton x-114層的樣品沉淀后不好溶解，因?yàn)橹惐怀樽撸さ鞍椎娜芙庑宰儾�。一般直接溶解在上樣buffer里跑電泳。 |
2樓2013-10-31 23:32:28
cicelyzh
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4樓2013-12-03 15:47:56
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5樓2016-03-19 12:14:02
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