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bjgymilyxz木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助--脂肪細(xì)胞使用MSC無血清培養(yǎng)基 已有1人參與
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各位戰(zhàn)友,最近在使用Gibco的MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞, 操作方法如下: 首先,使用含10%血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3天至細(xì)胞融匯; 然后,換成MSC無血清培養(yǎng)基,其中一組進(jìn)行MSC無血清培養(yǎng)基配制的增殖培養(yǎng)基(Growth Medium,GM)進(jìn)行正常增殖培養(yǎng),另一組使用MSC無血清培養(yǎng)基配制的分化培養(yǎng)基(Differentiation Medium,DM)進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)。 誘導(dǎo)分化組出現(xiàn)細(xì)胞生長沒有問題,但是,正常增殖培養(yǎng)組細(xì)胞大量聚集,形成白色團(tuán)狀,脫離細(xì)胞培養(yǎng)面,具體情況如下: GM組更換為無血清培養(yǎng)基后的第1-3天細(xì)胞生長及形態(tài)均正常。但是,第4天觀察到部分細(xì)胞出現(xiàn)成團(tuán)聚集,細(xì)胞團(tuán)的邊緣細(xì)胞稀少,且漸漸從培養(yǎng)脫落脫離。第6天,GM組的細(xì)胞聚集成團(tuán)現(xiàn)象嚴(yán)重,肉眼可見白色細(xì)胞團(tuán)(非細(xì)胞污染),貼壁細(xì)胞大量減少。第8天,GM組的細(xì)胞幾乎脫離細(xì)胞培養(yǎng)面,全部聚集成白色團(tuán)狀,極少數(shù)細(xì)胞貼壁。 想請問大家這究竟是怎么回事??要如何解決?? |

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