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yw-cell

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[交流] 復旦大學研究組發(fā)現(xiàn)治療慢性乙型肝炎的新策略已有1人參與

來自復旦大學醫(yī)學院醫(yī)學分子病毒學重點實驗室的研究人員發(fā)現(xiàn)，利用Talen技術剔除被感染細胞中的乙型肝炎病毒（HBV）可以作為一種治療乙型肝炎的新策略。
乙肝病毒感染會導致人類急、慢性乙型肝炎。據世界性衛(wèi)生組織報道，全球約20億人曾感染過乙肝病毒，其中3.5億人為慢性乙肝病毒感染者，每年約有100萬人死于乙肝病毒感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝癌（HCC）。目前治療乙肝的藥物主要是干擾素和核酸類似物，用于抑制乙肝病毒的復制，但是這些藥物不能徹底清除已經存在于患者細胞核的病毒。
復旦大學醫(yī)學院袁正宏教授及其博士研究生陳捷亮利用的最新的FastTALE Talen技術，設計了靶向不同基因型乙肝病毒的保守區(qū)序列的Talen，導入細胞和模型小鼠后，可以特異結合并切割病毒基因組，導致病毒HBeAg, HBsAg, HBcAg 和pgRNA以及cccDNA的表達與合成減少。同時發(fā)現(xiàn)針對乙肝病毒的Talen和干擾素α聯(lián)合使用可以使抑制病毒復制的效果增強。這個研究提示Talen和干擾素α的聯(lián)合用藥可能為治療慢性乙肝提供更優(yōu)化的治療方案。同時，也為其他病毒性疾病的研究和治療提出了新的思路。
該研究成果發(fā)表在近日的《Molecular Therapy》雜志上。參與本項研究的單位還有復旦大學公共衛(wèi)生應用中心及復旦大學醫(yī)學微生物學和生物醫(yī)學科學研究所。本研究工作得到了國家重點基礎研究發(fā)展計劃（973計劃）項目基金及國家科技重大專項基金的經費支持。

背景介紹：
TALEN 技術（Transcription activator–like effector Nuclease）是一種新的定點基因修飾技術，是基于植物病原體黃單胞菌( Xanthomonas) 分泌的一種轉錄激活子樣效應因子( transcription activator–like effector，TALE) 可以識別DNA序列的原理而設計和構建靶向特異基因的TALE蛋白的技術。TALE蛋白的DNA結合域是由可以識別單個核苷酸堿基的氨基酸序列模塊串聯(lián)而成的，氨基酸序列與其靶位點的核酸序列有恒定的對應關系。
TALEN 技術是將TALE 蛋白中的DNA結合域與FokI 核酸內切酶的切割域融合，設計和構建能在特定基因位點產生雙鏈斷裂的的技術。雙鏈斷裂可以極大的提高斷裂位點周圍的基因修復活性，利用易錯修復(非同源末端聯(lián)結)或者同源重組修復的方式實現(xiàn)特異位點DNA的改造，例如定點基因敲除 (Knock-out) 、基因敲入 (Knock-in) 或點突變修飾等等。該技術成功解決了RNAi技術中knockdown效率低下的問題，同時也克服了鋅指核酸酶（ZFN）技術篩選復雜、成本過高的缺點，也可以避免Crispr/CAS9造成的嚴重脫靶，使定點基因修飾（Knock out、Knock in等）工作變得更為高效和便捷。TALEN技術現(xiàn)已成功應用于動物（人類、鼠、、魚、家蠶等）、植物（煙草、水稻、擬南芥等）、微生物（酵母、病毒等），無基因序列、細胞類型和物種的限制利用。過去，將高度重復的Tale氨基酸模塊連接在一起相當困難，F(xiàn)astTALE技術的出現(xiàn)解決了這個問題，可以很容易地在1天內完成TALEN的構建。

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cncyb21

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