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王瑋瑋_fly鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
用發(fā)酵罐發(fā)酵釀酒酵母生產(chǎn)GSH 已有2人參與
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| 各位大俠，我用10L發(fā)酵罐使用釀酒酵母生產(chǎn)谷胱甘肽，沒有控制溶氧、pH，定時(shí)取樣檢測，發(fā)現(xiàn)沒有GSH的產(chǎn)生，懷疑是產(chǎn)生了GSH，已被氧化或是被菌體利用，且發(fā)酵過程中，發(fā)酵時(shí)間4-5天，接種量大約0.5%，pH先下降后上升至8.9，DO值先是100%后下降又上升至100%，所接樣菌體形態(tài)是渣狀，下一步不知道怎樣，希望大家給點(diǎn)建議。 |
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2樓2013-11-11 17:53:06
wt29088
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
王瑋瑋_fly: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-11-12 16:24:17
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
王瑋瑋_fly: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-11-12 16:24:17
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個(gè)人沒做過釀酒酵母，但是見過別人做過。結(jié)合發(fā)酵的一些經(jīng)驗(yàn)。 1、初期DO 100%是正常的，但是應(yīng)該接種后幾個(gè)小時(shí)內(nèi)就有明顯的下降趨勢。這個(gè)按菌種不同而不同，大腸桿菌很快就能看到效果。釀酒酵母可能下降的趨勢慢一點(diǎn)。 2、一般來講初期pH下降是由于糖類物質(zhì)的消耗，導(dǎo)致pH下降。后期可能是糖類物質(zhì)消耗完畢，分解蛋白胨 酵母粉之類的有機(jī)氮源使pH上升。 3、你不控制pH和補(bǔ)料，很可能釀酒酵母會(huì)產(chǎn)生乙醇，導(dǎo)致你的菌種中毒。 4、pH假如不在釀酒酵母生長范圍之內(nèi)，酵母可能死掉或者活性不好。 5、營養(yǎng)物質(zhì)消耗光了，酵母會(huì)自溶。即使酵母沒有死亡，營養(yǎng)物質(zhì)消耗光了，DO肯定是要上升的。 你都有發(fā)酵罐了，怎么不會(huì)控制pH和DO呢，隨便找找文獻(xiàn)看，都是有相關(guān)文獻(xiàn)的。還有補(bǔ)料這一塊你也沒做。 還有GSH的前體物質(zhì)，比如半胱氨酸什么的你也沒添加。 記憶中江南大學(xué)有發(fā)過一篇文章，忘了什么名字了，就是做釀酒酵母發(fā)酵生產(chǎn)GSH的優(yōu)化等的。 可能發(fā)表在AEM上或者 BT上還是AMB，當(dāng)時(shí)只是看過文章，但是現(xiàn)在忘掉了。 |
3樓2013-11-12 16:12:30
4樓2013-11-12 21:50:54
王瑋瑋_fly
鐵蟲 (初入文壇)
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5樓2013-11-13 10:37:25
superfido
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6樓2013-11-14 14:51:22
【答案】應(yīng)助回帖
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你這情況很可能是根本沒有GSH的產(chǎn)生。 接種量可以稍微加大一點(diǎn)，這個(gè)問題不大，溫度和ph還有溶氧是必要控制的，不知道你的培養(yǎng)基成分是不是合適。發(fā)酵過程中還需要補(bǔ)充碳源（糖或者甘油）和前體（半胱氨酸和甘氨酸），并需要控制其濃度。你得根據(jù)溶氧變化來推斷你的菌體生長狀態(tài)，做出相應(yīng)操作；并維持合適的溶氧。 你的發(fā)酵終點(diǎn)的判斷還不明確，你先選定一個(gè)測gsh的方法好了（化學(xué)法或者HPLC法都可以） 感覺你才開始做發(fā)酵，你需要先查些相關(guān)知識(shí)再繼續(xù)。 |
7樓2013-12-24 12:13:31
zhangxingc
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8樓2013-12-27 09:30:28
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