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風(fēng)之葉落金蟲 (初入文壇)
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[求助]
已知某種毒蛇能分泌一種劇毒的蛋白質(zhì),設(shè)計實驗分離此蛋白質(zhì)
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2樓2013-11-12 22:54:18
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銅蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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你可以制備該蛇毒蛋白的抗體，然后制備抗體交聯(lián)柱，這就可以從復(fù)雜樣品中親和分離出目的蛋白。 具體的： 這個蛋白的信息你應(yīng)該有，那可以表達(dá)這個蛋白，我表達(dá)過一些蛇毒蛋白，通常原核表達(dá)是可以的，如果你擔(dān)心毒性問題，可以分析抗原性，表達(dá)部分片段，或者直接分析后合成多肽表位，然后制備抗體（對于你的實驗要求，制備多抗就完全可以滿足要求了），最后將純化好的抗體，共價交聯(lián)到介質(zhì)中，就可以用來純化你要的這個蛋白了。 整個技術(shù)難點在于制備的抗體要能夠識別天然構(gòu)象的蛋白，即，抗體要保證能夠做IP（免疫沉淀），其余都是水到渠成的。 祝你好運。 |
3樓2013-11-22 13:23:04
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