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gc1027銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
聚苯乙烯微球血漿中吸附蛋白檢測(cè)方法的問(wèn)題
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各位前輩，我最近在做PS微球從血漿中吸附纖維蛋白原（FIB）的試驗(yàn)，我首先采用的方法是檢測(cè)PS微球吸附前后血漿中FIB的含量，通過(guò)吸附前減去吸附后來(lái)得到PS微球表面吸附的FIB量，但發(fā)現(xiàn)吸附前后血漿中FIB的量變化不大，無(wú)顯著性差異（采用的是ELISA 試劑盒），所以差值法是行不通的。所以我現(xiàn)在想直接檢測(cè)PS微球表面的FIB吸附量。 我想用試劑將PS微球表面上的血漿蛋白洗脫下來(lái)，再用ELISA進(jìn)行檢測(cè)FIB，請(qǐng)問(wèn)我該選用什么試劑？什么試劑既能有效洗脫蛋白，又能不影響ELISA的試驗(yàn)？SDS肯定不行的。吐溫20常被用于ELISA檢測(cè)這里能不能用于洗脫蛋白？聽說(shuō)尿素也能洗脫蛋白，這里可以用嗎？一般濃度多少？能提供相關(guān)文獻(xiàn)最好，謝謝！ 還有沒(méi)有更好的辦法，條件有限，只有一臺(tái)小酶標(biāo)儀，所以同位素標(biāo)記法，熒光標(biāo)記法，SPR，QCM等方法都不可以使用。 給大家出難題了，小弟不勝感激。 |
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feiliulei
銀蟲 (小有名氣)
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4樓2013-11-15 23:22:09
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gc1027: 金幣+6, ★有幫助 2013-11-13 13:34:22
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gc1027: 金幣+6, ★有幫助 2013-11-13 13:34:22
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一般PS球上洗脫的蛋白都會(huì)變性，這對(duì)于你用elisa進(jìn)行測(cè)試是十分不利的 感覺(jué)你還是應(yīng)該測(cè)上清液，幾點(diǎn)改進(jìn)意見： 1、PS球的量大一點(diǎn)，fib的其實(shí)濃度低一點(diǎn)； 2、Elisa實(shí)驗(yàn)是有測(cè)試飽和度的，測(cè)定時(shí)將fib稀釋下再測(cè) |
2樓2013-11-13 11:54:50
gc1027
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2013-11-13 13:41:08
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