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在做一個(gè)和official method對(duì)比的方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，關(guān)于method validation的問題
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想請(qǐng)教各位牛牛，我目前在做一個(gè)和official method比較看我的方法是不是更省時(shí)同時(shí)也很準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)。其中涉及到的物質(zhì)有脫鎂葉綠素a (pheophytin a)和原焦脫鎂葉綠酸a（pyropheophytin a)(不知道中文翻得對(duì)不對(duì)。。)，是算他們的比例。 由于是方法比較的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，所以要測(cè)LOD, LOQ, method accuracy, method precision等一系列的值，但是pyropheopytin a很難制得，我做method validation的時(shí)候是不是可以只用pheophytin a 一種standard呢？是不是有個(gè)原則是只要物質(zhì)結(jié)構(gòu)相似就可以只用一個(gè)物質(zhì)的standard validate method？ 另：有人用chlorophyll a制作過pheophytin a嗎？我搜了些paper，都沒有說得很清楚怎么做的。希望知道的筒子可以丟個(gè)paper或者method過來~ 非常感謝！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
release53: 金幣+1, 感謝交流 2013-11-24 17:08:19
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
release53: 金幣+1, 感謝交流 2013-11-24 17:08:19
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專屬性，線性，溶液穩(wěn)定性肯定是不能相似物質(zhì)代替，LOD，LOQ好像也不行，要算峰高的，系統(tǒng)精密度，方法精密度，中間精密度可以，但是要算出兩種物質(zhì)的相對(duì)相應(yīng)因子。準(zhǔn)確度不用做，因?yàn)閷?duì)于你的方法，線性和精密度過了就可以推論出你的準(zhǔn)確度也是過的，ICH里有這句話。 還有你說是比較性驗(yàn)證，是什么意思，能具體點(diǎn)么？大家討論一下~~~ |
2樓2013-11-22 21:48:57
3樓2013-11-22 21:56:17
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謝謝回復(fù)哈~ 就是測(cè)橄欖油中的pyropheophytin a（PPP）含量，是一個(gè)比較好的看thermal degradation的指標(biāo)。IOC已經(jīng)有一個(gè)certified的方法，最后用HPLC-DAD檢測(cè)的，但是步驟比較多，還要用到SPE。我的方法是不需要任何準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)，直接進(jìn)樣的。目前還在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)階段。想說取40個(gè)油樣，20個(gè)PPP較低的，20個(gè)PPP較高的，然后用傳統(tǒng)方法做一遍，再用我的新方法做一遍，看看結(jié)果是不是大概一致，然后驗(yàn)證一下HPLC的方法。不知道這樣設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)是不是ok~想發(fā)paper的 |
4樓2013-11-23 01:38:04
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我之前找到一篇paper里說做pheophytin a的方法，貼上來請(qǐng)大家?guī)兔纯�。黃色高亮的那部分我實(shí)在不明白到底是如何得到pheophytin a的濃度47.2mg/L的。。。 而且高亮之前那句Thereafter, acetone:water was added and the diethyl ether was evaporated under nitrogen是指之前在chl a stock solution里一起帶過來的acetone:water么？之后和diethyl ether一起被蒸發(fā)么？還是要另外加acetone:water？也沒說加多少啊。。是加到和stock solution一樣多，也就是100mL么？ 謝謝大家了>.< |
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2013-11-23 01:45:32, 109.73 K
5樓2013-11-23 01:53:39
6樓2013-11-23 23:28:44
niezher
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7樓2013-11-25 00:04:17
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你真幫我看啦~謝謝謝謝~我讓我教授也看了他也沒看懂。。。我打算直接去買STD了。。。 話說method validation有一個(gè)方法是comparison to a certified method：if you are conducting an analysis for a routine analyte for which there are certified methods available, then you can compare the results obtained by your method to the results obtained from the certified method. 但是我的實(shí)驗(yàn)是為了說明我這個(gè)方法和certified method做出來的結(jié)論comparable，不知道是不是還需要STD來從頭驗(yàn)證method呢？ |
8樓2013-11-25 10:00:32
9樓2013-11-25 10:02:00
10樓2013-11-25 10:40:49
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