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1066479423銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
細胞污染問題
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最近細胞總是污染，看著像是葡萄球菌，能不能再培養(yǎng)基里另外再加上抑制葡萄球菌的抗生素？？？？或者是平常有哪些需要注意的？？？ 謝謝 |
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1066479423
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2013-11-24 20:53:00
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【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2013-11-24 21:46:48
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2013-11-24 21:46:48
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加入雙抗了嗎？如果你覺得是菌污染的話，你可以做對照試驗組。 一個培養(yǎng)瓶里面加雙抗，一個不加，定期觀察，有無黑點，細胞形態(tài)之類的。 還有弱弱的說一句 細胞污染原因千奇百怪，一下子要說明為什么污染，污染源是什么，還是不怎么容易的。要長期摸索。 1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。 仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！ 可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理 污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等 關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細胞），37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長 就是操作的問題。 也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）或者鏈霉素和青霉素這個看細胞類了。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。 一些小的tips： 培養(yǎng)基重要性不說，你的操作，凈化間的環(huán)境，培養(yǎng)箱的水，紫外線，以及洗消過程中的任何一個環(huán)節(jié)。。。 平時養(yǎng)成好習(xí)慣。 |
2樓2013-11-24 12:40:04
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5樓2013-11-25 09:43:55
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