施子墨

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[交流] 免疫組織化學(xué)的片子怎么分析？有沒有專業(yè)的大俠幫我看下我拍的片子有什么問題

我做的組化的片子~
不知道怎么分子
怎么看抗體結(jié)合的效果、還有就是染色什么的
還有什么方面是不對的或者需要改的

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1樓 2013-11-27 15:04:33

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感覺顏色有點怪誒，陰陽對比明顯嗎？我也要做免疫組化，正在學(xué)習(xí)中，幫你頂啦

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2樓2013-11-27 19:34:06

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zh10246

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在學(xué)習(xí)中，幫你頂

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3樓2013-11-27 20:15:08

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2樓: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-11-27 19:34:06
感覺顏色有點怪誒，陰陽對比明顯嗎？我也要做免疫組化，正在學(xué)習(xí)中，幫你頂啦

什么是陰陽對比？
我一個染得時間短點
顏色深的估計是染色時間太長了
我的是肺組織

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4樓2013-11-29 14:29:11

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引用回帖:

4樓: Originally posted by 施子墨 at 2013-11-29 14:29:11
什么是陰陽對比？
我一個染得時間短點
顏色深的估計是染色時間太長了
我的是肺組織...

免疫組化里邊不是有陽性和陰性兩組嗎，陽性的就是加一抗，陰性就是加PBS。
我也在學(xué)，所以不太懂，你可以多看看文獻，咱共同努力吧！

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5樓2013-12-07 11:07:24

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5樓: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-12-07 11:07:24
免疫組化里邊不是有陽性和陰性兩組嗎，陽性的就是加一抗，陰性就是加PBS。
我也在學(xué)，所以不太懂，你可以多看看文獻，咱共同努力吧！...

我的片子技術(shù)支持說
背景太高我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不對
說把組織也染了、我都不知道讓誰給我講下
現(xiàn)在老師們都只懂自己研究方面
哎

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6樓2013-12-07 15:27:49

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6樓: Originally posted by 施子墨 at 2013-12-07 15:27:49
我的片子技術(shù)支持說
背景太高我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不對
說把組織也染了、我都不知道讓誰給我講下
現(xiàn)在老師們都只懂自己研究方面
哎...

背景太深可能是因為：未用酶消化處理切片；片子過厚，黏合劑使用不當；漂洗不夠徹底；底物成色反應(yīng)過久；蛋白封閉不夠或所用血清溶血；使用全血清抗體稀釋不夠或未用非免疫血清處理片子等。

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7樓2013-12-07 23:25:20

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是說你背景顏色深了吧。我們實驗室現(xiàn)在也只有我在做這個了，我問過以前畢業(yè)的師兄師姐，他們說影響免疫組化結(jié)果的因素很多，所以是需要摸索的，他們那時做的不錯，我推薦你兩篇文章，你可以看看，我覺得他們效果還不錯，僅供參考....
促性腺激素受體在半滑舌鰨繁殖周期中的作用研究_陳曉燕
大瀧六線魚繁殖內(nèi)分泌生理功能及GH基因部分序列的克隆_王連順

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8樓2013-12-08 22:15:03

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你的片子是什么切的，冰凍還是石蠟？
你做的組化是什么水平的，細胞還是分子水平的？
第一，我看到你的第一張片子，上面有很多碎點點，如果你是石蠟切片，那么這些東西很可能是石蠟碎屑和組織切片的殘渣。也就是說，你的切片在預(yù)處理時沒有清洗干凈（比如脫蠟）。
第二，如果你是做組織水平的染色，那么我看到的你的片子完全呈現(xiàn)均一的棕色，那么你的觀察目的是什么？如果你是做的IELISA，那么圖片里所有的組織均呈現(xiàn)同一種顏色，那么一種可能是你的實驗時失敗的，棕色只是非特異性結(jié)合產(chǎn)生的背景色，二種可能是你成功了，但是這樣得到的結(jié)論是待測物在組織中廣泛存在，可是。。。以我個人看來，第二種可能性不大。
第三，我看到了你最后一張片子，你使用的組織，標準情況下的切片是這個樣子的么？是不是碎了?

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9樓2013-12-17 16:25:12

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kinsch

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~~~~(>_<

~~~~ ，情況跟LZ一樣...有解決到么？

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10樓2013-12-19 22:31:02

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