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donggualily金蟲 (正式寫手)
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[求助]
DGGE的電壓與電流應(yīng)該設(shè)多少? 已有2人參與
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| 我是DGGE新手,按前輩們的建議,跑了個(gè)低電壓長(zhǎng)時(shí)間的DGGE電泳,目的序列470bp,75V,16h,40%-60%的變性梯度(做過垂直膠的梯度優(yōu)化),膠濃度8%?墒堑鹊诫娪窘Y(jié)束后染色才發(fā)現(xiàn),大部分條帶跑出去了,剩在膠里的條帶也沒有彎曲變形什么的,只不過所剩無幾了,于是膠上半部分空白。求助各位高手,為何這么低的電壓,16個(gè)小時(shí)還是跑出膠?是不是電流太大?電流應(yīng)該多大才合適?如何改進(jìn)實(shí)驗(yàn)?zāi)兀苛硗,?qǐng)教470bp的序列應(yīng)該是用8%的膠濃度還是6%?萬分感謝! |
金蟲 (正式寫手)
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