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HPLC方法測量擬南芥幼苗ABA遇到的問題
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諸位大俠： 最近我在提取測量5天的擬南芥幼苗中的ABA，提取方法大致就是用80%的甲醇（含有10mg/L的抗氧劑）直接研磨0.5或1g的材料，提取液和研缽都預冷了。大約用了10ml的浸提液，第一次直接放在4度冰箱里過夜，也試過用超聲波超聲30min后再放到冰箱里。過夜后離心收集上清液。之后的純化方法各種都試過，最近一次沒有做純化，直接上冷凍干燥機蒸干，用流動相（v甲醇：v水（含1%乙酸）=4:6）復溶，上HPLC測量。提取了三次，測了三次，每次標準品都有單一的峰大約17分鐘多點，樣品有雜峰，可就是在14分鐘后再也沒峰了，不知道哪出問題了。 想請教各位做過的，在提取的時候有什么需要注意的細節(jié)問題，比如研磨的時候需要弱光？4度浸提的時候需要一直搖晃？如果不做純化，蒸干后直接做HPLC，如果有ABA，其他雜質(zhì)應該不會干擾吧。 還想請教各位，現(xiàn)在想發(fā)表好點的SCI文章，測ABA比較好的方法包括Elisa方法嗎？謝謝！ |
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lp_0820
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3樓2013-12-23 15:03:52
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