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王文靜341新蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC的問題
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| 最近在做HPLC，很想搞明白流動(dòng)相中加入磷酸緩沖鹽的具體作用，知道是調(diào)節(jié)pH和改善峰型作用，最好結(jié)合分子結(jié)構(gòu)、鍵合相作用力、影響堿性或酸性成分解離作用等這幾方面幫忙分析一下，求解答疑惑，感激不盡 |
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4樓2013-12-09 14:21:09
yi_wang
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 采用反相色譜法分離弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品時(shí)，通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動(dòng)相的pH值越小，組分的k值越大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在；對弱堿，情況相反。分析弱酸樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液；分析弱堿樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。 |
2樓2013-12-09 13:02:23
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3樓2013-12-09 13:38:30
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5樓2013-12-09 20:31:45
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