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嬌嬌19871019新蟲(chóng) (小有名氣)
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多糖分離 已有1人參與
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想分離酸性糖和中性糖,該選用什么交換樹(shù)脂呢?DEAE-52還是DEAE-Sepharose CL-6B? 有什么較大差別? |
榮譽(yù)版主 (職業(yè)作家)
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ET.....
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至今應(yīng)用的陰離子交換劑有二乙基氨基乙基纖維素(DEAE2cellulose ) ,DEAE2葡聚糖( DEAE2Sephadex ) DEAE2瓊脂糖(DEAE2Sephadex) 3種, 其中以DEAE2cellulose應(yīng)用得最為廣泛。DEAE2cellulose具有開(kāi)放性的骨架, 多糖能自由進(jìn)入載體中并進(jìn)行迅速擴(kuò)散。它有較大的表面積,雖然其離子交換容量?jī)H為0170 ~0175mmol /g, 但其對(duì) 多糖的吸附量較離子交換樹(shù)脂大許多。另外由于纖維素上的離子交換基團(tuán)較少, 排列疏散且呈弱堿性, 所以對(duì)大分子的吸附較弱, 用一定離子濃度的鹽就可將其洗脫下來(lái)。陰離子交換柱層析適合于分離各種酸性、中性多糖以及粘多糖。其分離機(jī)理不是單一的離子交換, 而是吸附與解吸附, 所以其不僅可應(yīng)用于中性多糖與酸性多糖的分離, 也可應(yīng)用于不同中性多糖的分離。一般在pH值為6時(shí), 酸性多糖能吸附于A IER上, 中性多糖不吸附, 然后用pH值相同、離子強(qiáng)度不同的緩沖液將酸性多糖分別洗脫下來(lái), 但如果柱為堿性(即OH- 型) ,則中性多糖也能吸附。另外,些多糖還能與硼酸形成絡(luò)合物, 采用硼酸型A IER或硼酸溶液作流動(dòng)相, 從而使糖類物質(zhì)能在A IER上進(jìn)行分離純化。如黃芪用水提取, 經(jīng)Pb (OAC) 2 沉淀除去蛋白質(zhì), 加乙醇可使多種糖沉淀出來(lái)。粗多糖再溶于水, 通過(guò)硼酸型DEAE2纖維素柱, 以0101mol /L硼砂溶液洗脫, 再用乙醇、丙酮處理, 可得黃芪多糖成分AG21。其他黃芪多糖成分如AH21和AH22等, 也用同樣的工藝進(jìn)行分離純化。吳亞林等通過(guò)DEAE2Sepharose fast flow陰離子交換層析得到 純化的無(wú)花果多糖( FCPS) 。 |

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