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海馬細(xì)胞做活性氧檢測,染料染不上去
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我要測海馬細(xì)胞的活性氧水平,買的是碧云天的試劑盒,裝載探針DCFH-DA,無論是陽性對照還是我的細(xì)胞樣品,都染不上去,在熒光顯微鏡下看什么都沒有,就背景有一層弱弱的綠光。我的步驟都是按試劑盒說明書來的,就是用1:1000的無血清培養(yǎng)基稀釋DCFH-DA,我的無血清培養(yǎng)基是DMEM,然后去除細(xì)胞液,加入適當(dāng)?shù)南♂尯玫腄CFH-DA,37攝氏度培養(yǎng)箱孵育20分鐘,然后用無血清培養(yǎng)液洗滌三次,然后加適量的PBS,就用熒光顯微鏡觀察了,可是鏡下什么都沒有,實(shí)在不知道哪個(gè)環(huán)節(jié)出錯(cuò)了,請教各位大師的指點(diǎn)。![]() ![]() 已經(jīng)做了兩次了,都是染不上去 |
木蟲 (著名寫手)
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