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Devil_Jimmy

銀蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 腦血管結(jié)構(gòu)、功能異常及相

[求助] 單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析法（PCR-SSCP）技術(shù)中有一點(diǎn)不懂，求解釋下謝謝已有1人參與

單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析法（PCR-SSCP）：將PCR產(chǎn)物雙鏈DNA（dsDNA）變性為單鏈DNA（ssDNA），加樣于變性聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳，由于DNA分子在凝膠中的電泳遷移率與其分子量和空間結(jié)構(gòu)有關(guān)，而空間結(jié)構(gòu)又與ssDNA序列有關(guān)。因此，電泳結(jié)束后，ssDNA帶位置的差異即可反映出PCR產(chǎn)物序列的差異，從而對(duì)DNA中的單個(gè)堿基的替代、微小缺失或插入進(jìn)行檢測(cè)。
上面說道空間結(jié)構(gòu)和ssDNA序列有關(guān)，我不明白單鏈DNA應(yīng)該就是線性的，為什么會(huì)存在空間結(jié)構(gòu)的問題？而且還與它的序列有關(guān)？

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神外

1樓 2013-12-21 15:55:06

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進(jìn)軍海洋

木蟲 (著名寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

應(yīng)該使用的是非變性膠，而不是變性膠。

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回復(fù)此樓

2樓2014-05-02 16:43:59

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