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北京石油化工學院2026年研究生招生接收調劑公告
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肖thest

木蟲 (小有名氣)

神級

[求助] 求助引物設計:前前后后三次都有問題,請大神幫幫忙…………感激不盡 已有2人參與

共1067bp, 粗線是我需要看的基因區(qū)域,想設計一對引物,普通PCR后測序(單向測,所以上游或者下游引物離目標區(qū)域起碼60bp),用primer或者NCBI primer blast設計了三次,每次引物特異性較差或者退火溫度摸不出來。
下面是我的序列:
TGAGACTTTT CCGTTGCCGC TGGGAGCCGG AGGCGCGGGG ACCTCTTGGC GCGACGCTGC
CCCGCGAGGA GGCAGGACTT GGGGACCCCA GACCGCCTCC CTTTGCCGCC GGGGACGCTT
GCTCCCTCCC TGCCCCCTAC ACGGCGTCCC TCAGGCGCCC CCATTCCGGA CCAGCCCTCG
GGAGTCGCCG ACCCGGCCTC CCGCAAAGAC TTTTCCCCAG ACCTCGGGCG CACCCCCTGC
ACGCCGCCTT CATCCCCGGC CTGTCTCCTG AGCCCCCGCG CATCCTAGAC CCTTTCTCCT
CCAGGAGACG GATCTCTCTC CGACCTGCCA CAGATCCCCT ATTCAAGACC ACCCACCTTC
TGGTACCAGA TCGCGCCCAT CTAGGTTATT TCCGTGGGAT ACTGAGACAC CCCCGGTCCA
AGCCTCCCCT CCACCACTGC GCCCTTCTCC CTGAGGACCT CAGCTTTCCC TCGAGGCCCT
CCTACCTTTT GCCGGGAGAC CCCCAGCCCC TGCAGGGGCG GGGCCTCCCC ACCACACCAG
CCCTGTTCGC GCTCTCGGCA GTGCCGGGGG GCGCCGCCTC CCCCATGCCG CCCTCCGGgc
tgcggctgct gcCgctgctgcta ccgctgctgt ggctactggt gctgACGCCT GGCCGGCCGG CCGCGGGACT
ATCCACCTGC AAGACTATCG ACATGGAGCT GGTGAAGCGG AAGCGCATCG AGGCCATCCG
CGGCCAGATC CTGTCCAAGC TGCGGCTCGC CAGCCCCCCG AGCCAGGGGG AGGTGCCGCC
CGGCCCGCTG CCCGAGGCCG TGCTCGCCCT GTACAACAGC ACCCGCGACC GGGTGGCCGG
GGAGAGTGCA GAACCGGAGC CCGAGCCTGA GGCCGACTAC TACGCCAAGG AGGTCACCCG
CGTGCTAATG GTGGAAACCC ACAACGGTGA GCTCGGAGGG GCAGGGGAGC CGGGAGGGGG
GCCCCCAGGG GGCGCCGGAG TGCCGGGGCC ACGGGTAGGA AGTGACTGGC AGAAGAAACT
GGCTGGAGGA AGAGGACACC CCGGGGCAAA GGGA

[ Last edited by 肖thest on 2013-12-22 at 13:43 ]
回復此樓
thest
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肖thest

木蟲 (小有名氣)

神級

送紅花一朵
引用回帖:
2樓: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-22 18:35:26
上游:AAGCCTCCCCTCCACCACTG
下游:CCGCAGCTTGGACAGGATCT
肯定能出來
出不來你再聯(lián)系我

回復,很感謝,但是我看了您設計的結果,因為粗線是我要看的目標區(qū)域,可您設計的好像是338bp,我的目標區(qū)域沒有包括全哦。還是很謝謝
thest
3樓2013-12-22 19:48:34
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woshishui916

木蟲 (著名寫手)

【答案】應助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應助指數 +1
肖thest: 金幣+15, ★★★★★最佳答案, 很感激,很nice的人 2013-12-22 23:13:55
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流! 2014-01-27 20:45:26
上游:AAGCCTCCCCTCCACCACTG
下游:CCGCAGCTTGGACAGGATCT
肯定能出來
出不來你再聯(lián)系我

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2樓2013-12-22 18:35:26
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肖thest

木蟲 (小有名氣)

神級

引用回帖:
3樓: Originally posted by 肖thest at 2013-12-22 19:48:34
回復,很感謝,但是我看了您設計的結果,因為粗線是我要看的目標區(qū)域,可您設計的好像是338bp,我的目標區(qū)域沒有包括全哦。還是很謝謝...

我在分析下,好像看錯了。嗚嗚,我blast下
thest
4樓2013-12-22 19:52:31
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woshishui916

木蟲 (著名寫手)

【答案】應助回帖

你不是說黑體的是你想要的嗎?
難不成上面的序列你全部想要?
5樓2013-12-22 19:53:05
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