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worldbetter至尊木蟲 (著名寫手)
工地狗 單身狗
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[求助]
如何鑒定細(xì)菌的DNA受損狀況？ 已有2人參與
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我做的實(shí)驗(yàn)是殺菌，現(xiàn)在想看看殺菌后大腸桿菌的DNA受損狀況。 有人說(shuō)用糖瓊脂凝膠電泳能夠看出長(zhǎng)鏈DNA變成短的鏈了，我不需要達(dá)到很精確的效果，這種方法可以么？基本步驟怎么做？ 然后，如果我希望研究哪些位點(diǎn)容易受到這種殺菌因素的攻擊，是不是得測(cè)序？ |
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2樓2013-12-26 09:38:01
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
worldbetter: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 謝謝。 2013-12-26 17:04:34
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
worldbetter: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 謝謝。 2013-12-26 17:04:34
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有一種稱為"單細(xì)胞ＤＮＡ損傷微凝膠慧星（Comet assay）檢測(cè)術(shù)“的方法，應(yīng)該符合你的研究目的。 該檢測(cè)法又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)術(shù)（SCGE）或微凝膠電泳檢測(cè)術(shù)，是基于電場(chǎng)條件下，完整超螺旋DNA保持在細(xì)胞內(nèi)，而變性損傷的DNA片段，可從細(xì)胞中移出的原理。凝膠電泳后，呈現(xiàn)分子遷移圖形，形成彗星拖尾（comet tail）現(xiàn)象，完整DNA染色體為“頭”，而松散和斷裂的DNA為“尾”，以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。 該法是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其適用于新鮮細(xì)菌或細(xì)胞的DNA 損傷研究，包括DNA 鏈斷裂、DNA 剪切損傷、DNA 交聯(lián)等，目前已應(yīng)用于細(xì)菌的環(huán)境毒理學(xué)、放射學(xué)和抗生素敏感性研究等多領(lǐng)域。 《藥理學(xué)通報(bào)》上有一篇綜述，感興趣，可以參考一下：?jiǎn)渭?xì)胞DNA損傷的微凝膠慧星電泳檢測(cè)法-《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》，不過(guò)好像是九幾年的一篇，而且主要針對(duì)真核細(xì)胞的。 另外，這種檢測(cè)法，現(xiàn)在應(yīng)該有專門試劑盒賣�？勺孕猩暇W(wǎng)搜下。 |
3樓2013-12-26 10:43:20
worldbetter
至尊木蟲 (著名寫手)
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4樓2013-12-26 17:04:05
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