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小王8097木蟲 (著名寫手)
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申請書摘要 長鏈二元酸是一類用途廣泛的化工產(chǎn)品,為了減少目前二元酸生產(chǎn)對石油等不可再生資源的依賴,我們嘗試用大腸桿菌自身合成的脂肪酸為底物,轉(zhuǎn)化產(chǎn)生二元酸。主要有兩個步驟,步驟一是改造大腸桿菌脂肪酸代謝途徑,大量合成易于轉(zhuǎn)化成二元酸的脂肪酸底物。所采用的方法有:阻斷脂肪酸降解途徑,過量表達脂肪酸合成酶和硫酯酶,以提高脂肪酸產(chǎn)量;通過特異突變縮小縮合酶FabB的底物通道,以縮短脂肪酸鏈的長度,增加最易轉(zhuǎn)化為二元酸的十二碳脂肪酸的比例;過量表達脫水酶FabA,敲除脂肪酸合成抑制因子FabR,以提高脂肪酸不飽和程度。步驟二是在整合了以上改造的大腸桿菌中,分別過量表達來源于巨大芽孢桿菌、假絲酵母和小鼠的P450羥化酶和NADPH-P450還原酶,對比其二元酸轉(zhuǎn)化活性,在大腸桿菌中建立脂肪酸至二元酸(十二碳為主)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。 申請書主題詞 二元酸;大腸桿菌;脂肪酸;β-酮脂酰ACP合成酶Ⅱ;P450羥化酶 |
木蟲 (著名寫手)
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