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PCR預(yù)擴(kuò)增
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| 樓主最近做熒光定量,但是模板量很少,內(nèi)參Ct都在30以后,所以想做下預(yù)擴(kuò)增提高模板濃度?次墨I(xiàn)里面是先在第一鏈加ploy(A)的尾巴,然后再用通用引物進(jìn)行擴(kuò)增,不過我覺得這個處理主要是針對文章后來的測序用的,我不需要測序,是否用隨機(jī)引物六聚體來擴(kuò)增就行了?這兩種方法會不會產(chǎn)生擴(kuò)增偏差,就是改變初始模板中各基因的相對含量?請大家不吝賜教,謝謝! |
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