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trizol11木蟲 (正式寫手)
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[求助]
純化克隆 已有1人參與
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尊敬的各位蟲友: 我現(xiàn)在遇到一個問題,纏繞我很久了。你們有沒遇到PCR產物回收后濃度很低,無法達到克隆所需的濃度。 我剛測的回收產物1:260/280比值是3、 濃度是0.15微克每微升.2:260/280比值是1.66、濃度0.25維克每微升。 求大神指點! |

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
木蟲 (正式寫手)

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鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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4樓: Originally posted by trizol11 at 2014-01-03 11:31:00 你看到的我發(fā)出來的濃度是稀釋50倍的結果,我再乘以50,那么1微升就是至少6微克,我用這個體系:1 載體、4 目的片段、5 BUFFER,不加水了,你覺得可以么?... 做連接的話,在10-20μl體系里加入載體50ng,目的片段根據大小計算ng數,目的片段與載體的摩爾比為3:1。如果目的片段非常小,可以用到10:1。如果不長菌,通常是酶切的問題。 |
木蟲 (正式寫手)

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