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xiaoxi8601銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
有做過藥代排泄的蟲子們看過來，有關(guān)提取回收率 已有2人參與
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樓主在做大鼠糞中藥物的排泄率跟排泄量，用甲醇水將糞勻漿后離心取上清沉蛋白測(cè)定，想請(qǐng)教一下提取回收率怎么做呢？ 我的想法是舉個(gè)例子，取1g空白糞研磨粉末，加待測(cè)藥物A標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml）1ml混合，加甲醇水9ml后勻漿，離心取上清液100μl，加400μl甲醇沉蛋白，離心后進(jìn)樣測(cè)得峰面積W1。再直接進(jìn)相同濃度的A標(biāo)準(zhǔn)溶液（2μg/ml）得峰面積W2，比值即為提取回收率。我想知道這樣處理的糞藥最后的進(jìn)樣濃度是2μg/ml么？如果是的話得出的提取回收率很低，才百分之20.。。。。  求大神幫忙 |
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2樓2014-01-09 15:13:09
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3樓2014-01-16 09:20:15
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4樓2014-01-17 08:38:08
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5樓2014-01-17 08:38:51
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【答案】應(yīng)助回帖
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親，首先你把1g空白糞便的體積忽略了，這個(gè)不恰當(dāng)?shù)模瑧?yīng)該是加甲醇水定容到10ml，而不是直接加9ml甲醇水，這樣才能保證將A標(biāo)液稀釋了10倍，如果按照你的方法，你稀釋的應(yīng)該不止10倍。那么W1肯定會(huì)小些，本來做排泄物的時(shí)候回收率很低的，你這樣會(huì)使得回收率比真實(shí)值還要小。其他步驟和計(jì)算沒問題。但是為了提高回收率，親為什么用的是甲醇水來沉淀第一步蛋白呢？為什么不直接用甲醇，或者乙腈、氯仿等單一或者組合的提取劑呢？據(jù)我估計(jì)親要測(cè)的這種藥物應(yīng)該是溶于純有機(jī)溶劑的，而在水中的溶解度相對(duì)較小或者微溶或不溶，用純的有機(jī)溶劑應(yīng)該可以提高回收率！ |
6樓2014-01-17 10:11:51
小田123
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7樓2014-01-17 10:33:50
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