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liondolphin銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
red系統(tǒng)敲除用的感受態(tài)能放多久？同源臂太長會不會反而不好敲？ 已有2人參與
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| red重組系統(tǒng)中含有pkd46質(zhì)粒的菌在加阿拉伯糖誘導(dǎo)后做成電轉(zhuǎn)感受態(tài)，它在轉(zhuǎn)線性片段之前能在-80冰箱里放多久呀？我敲的是大腸DH5a，同源臂搞了個兩邊各800bp的，結(jié)果轉(zhuǎn)了2次，長了好多，結(jié)果就一個可能是我要的，是不是同源臂太長了的緣故？ |
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4樓2014-01-05 10:18:57
朱多龍
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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| 一般存到負(fù)80是有什么問題的，關(guān)鍵你要是誘導(dǎo)表達(dá)那三個功能蛋白后再存可能就會有影響，最好還是誘導(dǎo)完做好感受態(tài)直接使用。還有就是同源臂的問題，在大腸里每端200bp足夠了。太多了有時候會有其它位點(diǎn)重組的可能。 |
2樓2014-01-03 17:37:06
liondolphin
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3樓2014-01-04 18:20:23
liondolphin
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5樓2014-01-05 11:03:44
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