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[求助]
關(guān)于HPLC使用結(jié)束C18柱子的清洗 已有1人參與
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實(shí)驗(yàn)室有臺(tái)Agilent 1290 UPLC，用的是二元液相泵。A1（1%醋酸：99%水，v/v）和B1（50%甲醇：50%乙腈：v/v）里的流動(dòng)相是用來(lái)測(cè)橄欖/橄欖油中多酚物質(zhì)的，A2和B2也是固定經(jīng)常測(cè)橄欖/橄欖油里別的物質(zhì)的。 每次測(cè)完多酚，都會(huì)用B1流動(dòng)相無(wú)梯度洗脫1小時(shí)，不知道這樣可以嗎？看了些資料說(shuō)柱子最好保存在100%甲醇里因?yàn)榧状伎咕Ч纫译婧�？還有就是一般使用完畢柱子清洗是不是用這個(gè)梯度的比較多：10%甲醇水溶液1h-50%甲醇水溶液1h-100%甲醇水溶液1h，流速0.2ml/min合適嗎？ 我的問(wèn)題是我一般很多樣品，每個(gè)樣品要跑1h，一般我都是白天做好一個(gè)list，讓它跑著晚上它就自動(dòng)關(guān)了。這種情況下，我是不是每次都需要把A2/B2的溶液換掉換成A2（水）/B2（甲醇）最后清洗一遍我的柱子？還是用B1這個(gè)混合溶液0.2mL/min洗1h就ok（而且我一般最后洗兩遍，就是2h）？ 謝謝大家啦！ |
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yyall
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4樓2014-01-08 16:00:29
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2樓2014-01-08 13:54:12
3樓2014-01-08 14:05:49
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那我以后還是把A2和B2換成水和甲醇好了···這樣每次跑完我的sample在list最后加個(gè)wash method 跑個(gè)梯度最后讓柱子保存在100%甲醇里好了 ，這樣就沒(méi)問(wèn)題了吧  還有個(gè)疑問(wèn)哈~你每次換流動(dòng)相的時(shí)候，比如要把B2的5%甲醇水溶液換成100%水，你是直接先把filter放在一小杯水里浸泡一會(huì)兒，然后把filter放進(jìn)要用的B2水中，還是什么別的方法？我知道如果前后溶劑不相溶的話需要用100%異丙醇過(guò)渡，但是如果相溶直接放進(jìn)下一種溶劑不是污染了么。。不知道你們用什么方法？ 謝謝！ |
5樓2014-01-09 01:23:52
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