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rapidtest
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[求助]
緊急求助：細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)沒信號？
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1 試劑材料 PBS，無水乙醇，PBST，PI染料(sigma），受試細(xì)胞為Sp2/0 2 步驟 收集藥物處理后的細(xì)胞及空白對照細(xì)胞，2000轉(zhuǎn)離心5 min，去上清。 用預(yù)冷的PBS重懸，2000轉(zhuǎn)離心5 min，去上清，重復(fù)兩次。 離心收集的細(xì)胞重懸于300微升預(yù)冷的PBS中，然后再緩慢加入700微升預(yù)冷的無水乙醇，4度固定過夜。 固定后的細(xì)胞離心去上清，用預(yù)冷的PBST重懸，2000轉(zhuǎn)離心5 min，去上清，重復(fù)兩次。 收集的細(xì)胞重懸于100微升鞘液中，加5微升PI染液，避光15 min后，加400微升鞘液上機(jī)檢測。 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 上機(jī)檢測后，無法檢測到熒光信號。 PI染料別人用過，沒有問題。細(xì)胞流速選的中速 。前測散有信號。 求指教：原因何在？ |
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2樓2014-02-24 20:02:57
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