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922922銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
擬胚體在無lif培養(yǎng)基中培養(yǎng)問題
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請(qǐng)問各位前輩,先做擬胚體培養(yǎng),培養(yǎng)2天后,擬胚體竟然貼壁了。請(qǐng)各位前輩,我的protocol如下,幫忙分析一下。 1、正常消化的IPS細(xì)胞,制備成單細(xì)胞懸液。 2、接種于玻璃培養(yǎng)瓶,無lif的KSR培養(yǎng)基中。 3、接種半小時(shí)后,晃動(dòng)培養(yǎng)瓶防止貼壁。 4、培養(yǎng)1天后,發(fā)現(xiàn)有很多擬胚體形態(tài)形成。 5、第二天觀察時(shí),幾乎全部的擬胚體均已貼壁,并且部分的擬胚體疑似有分化跡象。 6、我之前也做過幾次的擬胚體培養(yǎng),效果較好,但是接種的細(xì)胞濃度比這次的小一倍。 |
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