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[求助]
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線中OD485為負(fù)值不知道什么原因,麻煩各位大俠幫忙分析下
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我的具體方法是: 稱取干燥的葡萄糖0.295g,于EP管中,加入2.95ml蒸餾水,相當(dāng)于0.1g/ml的葡萄糖,稀釋1000倍得到0.1mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,5%苯酚是將苯酚在65水浴鍋中融化后吸取2.5ml,用蒸餾水定容50ml配制的,按下面的量加入滅過菌的試管中,水浴煮沸1h,冷卻后測OD485 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mg/ml)/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 蒸餾水/ml 2 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1,4 5%苯酚/ml 1 1 1 1 1 1 1 濃硫酸/ml 5 5 5 5 5 5 5 2個平行對照 空白顯微弱的粉紅色,前幾個有的顯負(fù)值,0.4,0.5,0.6ml葡萄糖中分別有一個管顯黃色,大部分顯粉紅色 另外發(fā)酵液外得到的粗胞外多糖顏色深,深紅色吧,與空白對照時均未-9999,不知道是不是超過量程了。 這次共做了22個試管,分析了下原因,我是苯酚分別加入后,每個試管加完后加的濃硫酸,難道是因?yàn)樾枰尤氡椒雍篑R上加濃硫酸? 再者為什么平行間有這么大的區(qū)別,難道與加入濃硫酸的方式有關(guān)?我是沿壁旋轉(zhuǎn)著加入的。 各位有做過這個實(shí)驗(yàn)的?求指導(dǎo)。。。 |
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