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once1015木蟲 (正式寫手)
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[求助]
有關(guān)雙底物催化反應(yīng)的Km值的問題 已有3人參與
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本人對生化了解比較少，特請教一個問題： 我的催化反應(yīng)如下： 1;A+NADPH-----(酶催化)--------B+NADP+ 2; A+NADH-----(酶催化)--------B+NAD+ 也就是我的酶可以利用 NADPH 或者NADH 做輔酶。 可是我在計算 關(guān)于底物A的Km值的時候 （兩次分別是 用不同的輔酶過量）兩次的結(jié)果有一定偏差（大概差5%）。 可是生化書上面寫的是 Km說明了底物與酶的結(jié)合能力啊，應(yīng)該是常數(shù)，與輔酶沒有關(guān)系啊。 請問，我的實驗偏差是可以存在的？ 還是兩個Km值一定相同？ |
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hl16010921
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2014-02-14 13:23:44
gyesang: 回帖置頂 2014-03-30 00:24:28
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gyesang: 回帖置頂 2014-03-30 00:24:28
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1.Km值反映底物與酶的結(jié)合，但其本質(zhì)是1/2Vmax的濃度。不同輔酶可能影響反應(yīng)速度，也可能影響底物的結(jié)合。在這個反應(yīng)中實際輔酶也是一種底物，不過其Km遠(yuǎn)低于工作濃度，在反應(yīng)過程中濃度變化對反應(yīng)速度影響很小。 2.由于NADPH和NADH的結(jié)構(gòu)比較類似，二者對有些酶的影響相差不大。有5%的差異是正常的。酶的參數(shù)測定一般都是要標(biāo)注具體測定方法的，使用不同方法得到的Km有差異是很正常的。 |
4樓2014-02-08 08:22:26
pennchem
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2樓2014-02-03 01:03:28
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3樓2014-02-05 11:43:14
5樓2014-02-14 10:13:39
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