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yzliuxi銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
從氨基酸序列到基因克隆 已有5人參與
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求助各位高人,本人對(duì)分子一無(wú)所知,不料卻被領(lǐng)導(dǎo)要求寫(xiě)東西,被搞得暈頭轉(zhuǎn)向,文獻(xiàn)也看不明白。 我的設(shè)想是分離出的一種肽類活性物質(zhì),通過(guò)edman降解獲得氨基酸序列,然后怎么樣通過(guò)獲得的氨基酸序列得到這種物質(zhì)的基因呢(假設(shè)搜索不到什么同源序列之類的)?具體采取什么技術(shù)方法? 我只大概的知道要設(shè)計(jì)引物,用RACE獲得全長(zhǎng)。其余的具體怎么描述? 拜托大家?guī)蛶兔。。。?br /> [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
版主 (文壇精英)

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如果不對(duì)目標(biāo)蛋白的基因進(jìn)行研究,只要得到表達(dá)蛋白的基因,可以人工合成基因。如果要克隆到原基因,可以考慮根據(jù)測(cè)到的蛋白序列設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物,對(duì)Oligo(dT)反轉(zhuǎn)錄的cDNA文庫(kù)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。根據(jù)提取的蛋白大小估計(jì)PCR擴(kuò)增片段的大小,測(cè)序鑒定。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |

銀蟲(chóng) (初入文壇)
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)



木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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