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sundasoccer鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
高分求助，關(guān)于骨轉(zhuǎn)移瘤的細胞培養(yǎng)，不勝感激
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各位師長，一事相求，我做肺癌與前列腺癌的骨轉(zhuǎn)移瘤細胞培養(yǎng)。肺癌的骨轉(zhuǎn)移瘤查到了文獻，前列腺癌的骨轉(zhuǎn)移瘤沒查到，該怎么操作？ 這是肺癌的骨轉(zhuǎn)移瘤操作：選取手術(shù)前未經(jīng)任何治療的肺癌溶骨性骨轉(zhuǎn)移的患者10例，切取轉(zhuǎn)移灶進行細胞培養(yǎng)，于術(shù)中無菌條件下切取轉(zhuǎn)移灶實體腫瘤組織塊，立即浸入無血清培養(yǎng)液保鮮，將獲得的組織材料在無菌條件下剪切成約1-2mm3小組織快，用0.25 %胰蛋白酶消化液在4度環(huán)境下進行冷消化12小時，離心后去除上清液，再次加入0.25 %胰蛋白酶消化液，置37度溫箱中溫熱消化20-30分鐘，離心去除胰蛋白酶并用細胞培養(yǎng)液漂洗2次，離心去除上清制備成細胞懸液。將該細胞懸液按5×105-1×106個/ml細胞計數(shù)接種于25毫升細胞培養(yǎng)液中，加入pH值為7.0-7.2的RPMI1640培養(yǎng)液4毫升(內(nèi)含終濃度為100U/ml青霉素和100 μg/ml鏈霉素)置于37度、5%CO2、飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)，約2-4天細胞開始貼壁生長后，依據(jù)不同細胞對胰蛋白酶消化液的不同耐受時間以及差異離心的方法將原代培養(yǎng)的混雜生長細胞進行分離、純化，去除成纖維細胞等雜質(zhì)細胞，獲得所需的腫瘤細胞。 我的問題是：前列腺癌骨轉(zhuǎn)移瘤是不是也可以這么操作？ 十分感激！ |
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sundasoccer
鐵蟲 (小有名氣)
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2樓2014-02-15 23:47:31
3樓2015-07-07 10:26:39
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