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[求助]
免疫組化，二抗選擇 已有2人參與
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初次做免疫組化，一抗是neurofilament(神經(jīng)絲蛋白NFM,兔多克隆抗體) 和 glial fibrillary acidic protein(神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白，GFAP,兔多克隆抗體)，熒光二抗分別選擇什么？希望兩種二抗一種標(biāo)記綠熒光，另一種標(biāo)記紅熒光。 期待懂得人能指點(diǎn)一下！非常感謝！ |
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jurkat.1640
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5樓2014-02-21 10:53:40
jiaolong11a
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2樓2014-02-20 15:34:35
3樓2014-02-20 16:51:37
jiaolong11a
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【答案】應(yīng)助回帖
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137167741: 金幣+2, BioEPI+1, 鼓勵(lì)交流~~ 2014-02-23 12:50:07
137167741: 金幣+2, BioEPI+1, 鼓勵(lì)交流~~ 2014-02-23 12:50:07
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同樣學(xué)習(xí)一下：二抗需與一抗的類(lèi)別或亞類(lèi)相匹配。這通常是針對(duì)單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類(lèi)免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。其中單克隆抗體的類(lèi)別及亞類(lèi)通常會(huì)在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中都會(huì)有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(lèi)（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者你也可以選擇專(zhuān)門(mén)針對(duì)這一亞類(lèi)的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。在不清楚一抗為何種類(lèi)/亞類(lèi)的情況下，可以選用抗相應(yīng)物種IgG。 |
4樓2014-02-21 09:15:01
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